[發(fā)明專利]可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末及其制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710044939.1
• 申請日: 2017-01-20
• 公開（公告）號: CN106754549A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設計）人: 邵宗澤;單大鵬;李旭;林劍輝;王麗萍
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K50/80;A23K10/18;A23K20/163;A23K20/147;A61K35/747;A61P31/04;C12R1/25;C12R1/23
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙)35200
• 代理人: 馬應森

1.可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末，其特征在于其含有：植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)1A07806和嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)PL7及其微囊外壁；

所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)1A07806的保藏編號為CCTCC NO：M2013293；

所述嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)PL7的保藏編號為CCTCC NO：M2013294。

2.如權利要求1所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末，其特征在于所述微囊外壁采用水溶性食用膠、環(huán)狀糊精、纖維素衍生物、明膠、酪蛋白中的至少兩種作為微囊外壁。

3.如權利要求1或2所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末，其特征在于所述微囊外壁通過微囊制粒機對樣品進行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的微囊外壁，制成可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末。

4.如權利要求1所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)配制種子培養(yǎng)基500ml，滅菌；

2)將凍存的菌種活化劃線于相應的平板，再將活化后的單克隆接種于種子培養(yǎng)基培養(yǎng)；

3)配制發(fā)酵培養(yǎng)基，將50L發(fā)酵培養(yǎng)基作為一級種子培養(yǎng)基，加入低聚果糖或海藻糖中的一種作為促進乳酸菌生長劑，滅菌；

4)將步驟2)培養(yǎng)獲得的初級活化種子接種于50L一級種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再通過移種管接種于1000L發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，活菌數(shù)≥8×10⁹CFU/mL；

5)發(fā)酵結束后，管式離心機離心收集菌體，得菌泥；

6)將步驟5)獲得的菌泥添加維生素C、海藻糖、淀粉糊精、低聚果糖等中的至少兩種作為保護劑，混合均勻后，再平鋪于樣品凍干機的樣品板，并將菌泥分成小塊；

7)將步驟6)獲得的植物乳桿菌粉末與維生素C、葡萄糖、淀粉混合，采用水溶性食用膠、環(huán)狀糊精、纖維素衍生物、明膠、酪蛋白等中的至少兩種作為微囊外壁，通過微囊制粒機對樣品進行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末。

5.如權利要求4所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述滅菌的溫度為115℃，滅菌的時間為30min；

在步驟2)中，所述培養(yǎng)是靜置培養(yǎng)18h。

6.如權利要求4所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末的制備方法，其特征在于在步驟3)中，所述低聚果糖或海藻糖采用質量百分濃度為0.5％低聚果糖或海藻糖，所述滅菌是在115℃滅菌30min。

7.如權利要求4所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末的制備方法，其特征在于在步驟4)中，所述接種于50L一級種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)是采用靜置培養(yǎng)12h；所述接種于1000L發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)是采用靜置培養(yǎng)48h。

8.如權利要求4所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末的制備方法，其特征在于在步驟6)中，所述維生素C、海藻糖、淀粉糊精、低聚果糖中的至少兩種的添加量按質量百分比為菌泥的1％。

9.如權利要求4所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末的制備方法，其特征在于在步驟7)中，所述維生素C的加入量按質量百分比為植物乳桿菌粉末的1％，所述葡萄糖的加入量按質量百分比為植物乳桿菌粉末的20％，所述淀粉的加入量按質量百分比與植物乳桿菌粉末等量；所制得的可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末的直徑為300μm。

10.如權利要求1所述可長期保存的水產養(yǎng)殖用復合乳酸桿菌粉末在制備防治對蝦病害藥物、飼料添加劑、對蝦生長促進劑中應用；所述對蝦病害可包括紅腿病、爛眼病、甲殼潰瘍病、偷死癥及由弧菌引起的癥狀。