[發明專利]非糖基化蛋白質的純化

在審

• 申請號: 201710044891.4
• 申請日: 2009-01-15
• 公開（公告）號: CN107033233A
• 公開（公告）日: 2017-08-11
• 發明（設計）人: R·法爾肯施泰因;B·魏丹茲;C·吉賽爾;S·格賴塔納;A·格羅斯曼;F·赫西;B·克雷默;M·蓬皮阿蒂;A·肖布馬爾;N·菲爾勒
• 申請（專利權）人: 弗·哈夫曼-拉羅切有限公司
• 主分類號: C07K14/56
• 分類號: C07K14/56;C07K1/18
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所11247
• 代理人: 柴云峰,黃革生

1.用于純化已經在原核細胞中重組產生的IFNα-2a的方法，其特征在于所述方法包括以下順序的以下步驟：a)疏水作用層析,b)陰離子交換層析,c)陽離子交換層析。

2.權利要求1的方法，其特征在于所述方法由以下順序的以下步驟組成：a)疏水作用層析,b)陰離子交換層析,c)陽離子交換層析。

3.權利要求1的方法，其特征在于所述方法包括以下順序的以下步驟作為僅有的層析步驟：a)疏水作用層析,b)陰離子交換層析,c)陽離子交換層析。

4.權利要求1的方法，其特征在于所述原核細胞是大腸桿菌細胞。

5.前述權利要求任何一項的方法，其特征在于所述方法在步驟c)后包括額外的步驟，其為d)聚乙二醇化所述多肽。

6.在原核細胞中重組產生IFNα-2a的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

a)在適合于表達所述IFNα-2a的條件下培養包含編碼所述IFNα-2a的核酸的原核細胞，

b)從培養基或原核細胞中回收所述IFNα-2a，

c)利用權利要求1-3任一項的方法純化所述IFNα-2a。

7.用于通過包含體在原核細胞中重組產生IFNα-2a的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

a)在適合于表達所述IFNα-2a并形成含有所述IFNα-2a的包含體的條件下培養包含編碼所述IFNα-2a的核酸的所述原核細胞，

b)從所述原核細胞中回收所述包含體，

c)從所述包含體中溶解并復性所述IFNα-2a，

d)通過權利要求1-3任一項的方法純化所述IFNα-2a。

8.前述權利要求任何一項的方法，其特征在于在第三個層析步驟后獲得的多肽溶液中內毒素、和/或大腸桿菌DNA、和/或大腸桿菌細胞蛋白質的含量與第一個層析步驟之前的含量相比降低了。