[發明專利]一種用頂空進樣檢測煙酰胺中甲苯殘留的方法

在審

• 申請號: 201710043893.1
• 申請日: 2017-01-19
• 公開（公告）號: CN106770837A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 韋琛鴻;居虎軍;蔣偉;夏建榮;王長才;徐榮莽
• 申請（專利權）人: 安徽瑞邦生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/24;G01N30/68;G01N30/86
• 代理公司: 馬鞍山市金橋專利代理有限公司34111
• 代理人: 魯延生

技術領域

本發明屬于生物化工技術領域，尤其涉及一種用頂空氣相色譜法檢測煙酰胺中甲苯殘留的方法。

背景技術

煙酰胺俗名VB3，又名尼克酰胺(Nicotinamide)，分子式C₆H₆N₂O，分子量122.13，為白色針狀結晶或粉末，熔點129～131℃，易溶于水、能溶于醇和甘油，不溶于醚，微毒，是生物體內脫氫輔酶I或II的組分，參與碳水化合物、脂肪和蛋白質的代謝，在醫藥中可用于治療糙皮病等，還可以添加到食品和面粉中用以補充人體所需的維生素，其最大的應用領域是用作飼料添加劑。

煙酰胺的合成工藝有化學合成法和生物催化法兩種：生化法主要工藝為：采用腈水合酶的固定化細胞將3-氰基吡啶水解為煙酰胺；化學合成法主要有對3-甲基吡啶(PIC)進行氨氧化得到3-氰基吡啶(NSN)，所得到的3-氰基吡啶的混合氣體在抽提精餾工序用甲苯將3-氰基吡啶抽提出來，再進行蒸餾分離，分離出來的3-氰基吡啶進入生化水解工序進行水解反應，得到煙酰胺，然后進行后續的工序處理，最終得到煙酰胺產品。但是在采用化學合成法時，3-氰基吡啶需要利用甲苯進行萃取、蒸餾、濃縮、純化，這就導致煙酰胺中殘留有甲苯，尤其是將煙酰胺作為藥物或添加劑供人使用時，由于甲苯對人體是有害的，因此對甲苯的殘留量有很高的要求。

發明內容

本發明的目的是提供一種能用頂空氣相色譜法檢測煙酰胺中甲苯殘留的方法，精確度高，實現檢測的連續性，提高檢測的靈敏度及重復性。

為了實現上述的發明目的，采用的技術方案如下：

一種用頂空氣相色譜法檢測煙酰胺中甲苯殘留的方法，包括以下步驟：

步驟S101、對照溶液配制

1)取10mg甲苯至10.00mL容量瓶中，精密稱定(精確至±0.01mg)，用二甲亞楓稀釋，得到儲備液；

2)移取1.0mL儲備液至50.00mL容量瓶中，用二甲亞楓稀釋，得到對照液A；

3)移取2.0mL儲備液至50.00mL容量瓶中，用二甲亞楓稀釋，得到對照液B；

步驟S102、樣品供溶液配制

準確稱取100.0±10.0mg樣品(精確至±0.1mg)至頂空進樣瓶，并加入1.0mL二甲亞楓，然后用聚四氟乙烯隔墊和鋁蓋密封；

步驟S103、標準供試液配制

1)標準供試液1：準確稱量100.0±10.0mg樣品(精確至±0.1mg)至頂空進樣瓶，并加入1.0mL對照液A，然后用聚四氟乙烯隔墊和鋁蓋密封；

2)標準供試液2：準確稱量100.0±10.0mg樣品(精確至±0.1mg)至頂空進樣瓶，并加入1.0mL對照液B，然后用聚四氟乙烯隔墊和鋁蓋密封；

步驟S104、采用頂空-氣相色譜質譜法測定

1)毛細管色譜柱操作條件：采用Agilent19091J-413HP-5色譜柱，大小為30m×0.32mm×0.25μm；色譜操作條件為：柱溫：60～210℃，初溫從60℃開始以10℃/min升溫速率升至120℃，再以20℃/min升溫速率升至210℃，保持2min；汽化室溫度：210℃；檢測器溫度：280℃，載氣：氮氣、0.6mL/min；

2)頂空進樣器操作條件為：加熱箱溫度，80℃；定量環溫度，120℃；傳輸線溫度，120℃；樣品瓶平衡時間，25min；進樣持續時間，1.5min；GC循環時間，27min；樣品瓶體積，20mL；樣品瓶填充模式：缺省：恒定流量；定量環填充模式：缺??；

步驟S105、采用標準加入法，且樣品進行平行分析

1)查看各組分出峰時間

以空白溶劑(二甲亞楓)—對照液A—對照液B—空白溶劑(二甲亞楓)的進樣順序依次進樣，分析出二甲亞楓以及甲苯的出峰時間；

2)進樣

以供試液—標準供試液1—供試液—標準供試液2—空白溶劑(二甲亞楓)的進樣順序依次進樣檢測；

步驟S106、結果計算

甲苯的含量結果以μg/g，以下式計算

式中：

G—甲苯的濃度，μg/g；

A_P—供試液色譜的甲苯峰面積；

A_V—添加標準供試液色譜的甲苯峰面積；

m—添加標準供試液加入甲苯的質量，μg；

M_P—供試液中煙酰胺的質量，mg；

M_V—添加標準供試液中煙酰胺的質量，mg。