[發(fā)明專利]一種對細(xì)胞中X染色體定量檢測的方法和試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710042837.6
• 申請日: 2017-01-20
• 公開（公告）號: CN108330187B
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙欣之;張強(qiáng);郭曉紅;田天;王騰
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6869
• 分類號: C12Q1/6869
• 代理公司: 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

1.一種對細(xì)胞中X染色體定量檢測的試劑盒，其特征在于，含SAT1，UXT和UTP14A基因啟動子區(qū)序列作為XIDMR，以及包含對DNA甲基化檢測的前處理試劑，用于對細(xì)胞中X染色體檢測定量；

所述XIDMR，SAT1基因XIDMR序列如SEQ ID NO：1所示，UXT基因XIDMR序列如SEQ ID NO：2所示，UTP14A基因XIDMR序列如SEQ ID NO：3所示。

2.如權(quán)利要求1的對細(xì)胞中X染色體定量檢測的試劑盒，其特征在于， DNA前處理采用亞硫酸鹽氧化法，將未甲基化的胞嘧啶（C）氧化為尿嘧啶（U），并在后續(xù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）中轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶（T）。

3.如權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，還包含對所述XIDMR進(jìn)行擴(kuò)增的試劑和引物；擴(kuò)增通過PCR反應(yīng)進(jìn)行。

4.如權(quán)利要求3所述試劑盒，其特征在于，擴(kuò)增SAT1基因XIDMR的引物對序列為SEQ IDNO：4和SEQ ID NO：5；擴(kuò)增UXT基因XIDMR的引物對序列為SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：7；擴(kuò)增UTP14A基因XIDMR的引物對序列為SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：9，其中SEQ ID NO：5、SEQ IDNO：7和SEQ ID NO：9所述序列引物5’端使用生物素標(biāo)記。

5.如權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，包含對XIDMR進(jìn)行焦磷酸測序檢測DNA甲基化的引物，其中，SAT1基因XIDMR的焦磷酸測序引物為SEQ ID NO：10；UXT基因XIDMR的焦磷酸測序引物為SEQ ID NO：11；UTP14A基因XIDMR的焦磷酸測序引物為SEQ ID NO：12。