[發明專利]用于鑒定六種褐腐病菌的實時熒光定量PCR檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 201710038408.1
• 申請日: 2017-01-19
• 公開（公告）號: CN106755476B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 朱小瓊;國立耘;王靜茹
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;白艷

1.一種用于鑒定或輔助鑒定褐腐病菌的成套引物，其包括Mfc引物探針組合物、Mla引物探針組合物、Mmu引物探針組合物、Mfg引物探針組合物、Myu引物探針組合物和Mpo引物探針組合物；

所述Mfc引物探針組合物由Mfc引物對和Mfc探針組成；所述Mfc引物對由上游引物MfcF和下游引物MfcR組成；所述上游引物MfcF的核苷酸序列為序列表的序列1，所述下游引物MfcR的核苷酸序列為序列表的序列2；所述Mfc探針的核苷酸序列為序列表的序列3；

所述Mla引物探針組合物由Mla引物對和Mla探針組成；所述Mla引物對由上游引物MlaF和下游引物MlaR組成；所述上游引物MlaF的核苷酸序列為序列表的序列4，所述下游引物MlaR的核苷酸序列為序列表的序列5；所述Mla探針的核苷酸序列為序列表的序列6；

所述Mmu引物探針組合物由Mmu引物對和Mmu探針組成；所述Mmu引物對由上游引物MmuF和下游引物MmuR組成；所述上游引物MmuF的核苷酸序列為序列表的序列7，所述下游引物MmuR的核苷酸序列為序列表的序列8；所述Mmu探針的核苷酸序列為序列表的序列9；

所述Mfg引物探針組合物由Mfg引物對和Mfg探針組成；所述Mfg引物對由上游引物MfgF和下游引物MfgR組成；所述上游引物MfgF的核苷酸序列為序列表的序列10，所述下游引物MfgR的核苷酸序列為序列表的序列11；所述Mfg探針的核苷酸序列為序列表的序列12；

所述Myu引物探針組合物由Myu引物對和Myu探針組成；所述Myu引物對由上游引物MyuF和下游引物MyuR組成；所述上游引物MyuF的核苷酸序列為序列表的序列13，所述下游引物MyuR的核苷酸序列為序列表的序列14；所述Myu探針的核苷酸序列為序列表的序列15；

所述Mpo引物探針組合物由Mpo引物對和Mpo探針組成；所述Mpo引物對由上游引物MpoF和下游引物MpoR組成；所述上游引物MpoF的核苷酸序列為序列表的序列16，所述下游引物MpoR的核苷酸序列為序列表的序列17；所述Mpo探針的核苷酸序列為序列表的序列18。

2.根據權利要求1所述的成套引物，其特征在于：

每個所述引物探針組合物中的上游引物和下游引物的摩爾比均為1：1。

3.根據權利要求1或2所述的成套引物，其特征在于：

在所述探針的5’末端均修飾熒光基團FAM；

在所述Mfc探針的3’末端修飾淬滅基團BHQ；

在所述Mla探針、所述Mfg探針、所述Myu探針、所述Mmu探針和所述Mpo探針的3’末端均修飾淬滅基團MGB。

4.一種用于鑒定或輔助鑒定褐腐病菌的實時熒光PCR試劑，其包括權利要求1-3中任一所述的成套引物。

5.一種用于鑒定或輔助鑒定褐腐病菌的試劑盒，其包括權利要求1-3中任一所述的成套引物或權利要求4所述的實時熒光PCR試劑。