[發(fā)明專利]一種黃曲霉毒素適配體親和柱及其制備方法和用途

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710037561.2
• 申請日: 2017-01-19
• 公開（公告）號: CN106970172A
• 公開（公告）日: 2017-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張彥明
• 申請（專利權(quán)）人: 北京美正生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/60
• 分類號: G01N30/60;G01N30/06;G01N33/544
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1.一種黃曲霉毒素B1的適配體親和柱，其特征在于包含有載體和黃曲霉毒素B1適配體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的親和柱，其特征在于適配體通過化學(xué)鍵偶聯(lián)在載體上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的親和柱，其特征在于所述的適配體是核酸適配體，更具體的是寡聚脫氧核苷酸適配體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3中所述的核酸適配體，其特征在于所述的適配體序列為序列1所描述的核酸序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求1中所描述的適配體，其特征在于適配體是經(jīng)過化學(xué)修飾的適配體。

6.根據(jù)權(quán)利要求5中所描述的適配體，其特征在于修飾方式包括但不限于氨基修飾、羧基修飾、巰基修飾及生物素修飾。

7.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的適配體親和柱，其特征在于所述的載體是瓊脂糖凝膠或者化學(xué)合成的固相載體。

8.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的親和柱，其特征在于所述的瓊脂糖凝膠包含但不限于N-羥基琥珀酰亞胺活化的瓊脂糖凝膠、溴化氰活化的瓊脂糖凝膠、交聯(lián)的瓊脂糖凝膠、聚丙烯酸瓊脂糖凝膠、。

9.根據(jù)權(quán)利要求5中所描述的化學(xué)合成的固相載體載體，包括但不限于聚苯乙烯，多孔聚苯乙烯及交聯(lián)多孔聚苯乙烯填料。

10.一種純化黃曲霉毒素B1親和柱制備方法，其特征在于

選擇N-羥基琥珀酰亞胺活化后的載體，將載體干粉用1mmol/L的鹽酸浸泡過夜進行活化；

每克活化的載體加入30-200nmol的適配體，在0.1M NaHCO₃，0.5M NaCl PH8.3的緩沖液中，室溫偶聯(lián)2小時，或者4℃偶聯(lián)過夜；

偶聯(lián)產(chǎn)物用1M Tris.HCl PH 8.0 室溫反應(yīng)2小時；

偶聯(lián)好的載體-適配體，用20mM PH7.4的PBS洗滌；

用含有0.01%硫柳汞的10mM PBS PH7.4 洗滌黃曲霉毒素B1適配體-載體偶聯(lián)產(chǎn)物，裝柱，放于4℃保存。

11.一種黃曲霉毒素B1的適配體親和柱，其用途在于對待檢物中的黃曲霉毒素B1的富集和純化。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的待檢物，其特征在于待檢物包含但不限于糧食、飼料、牛奶及乳制品、調(diào)味料、水產(chǎn)、血液、尿液和水。