[發明專利]一種測定富硒酵母中無機硒和有機硒含量的方法

有效

• 申請號: 201710031377.7
• 申請日: 2017-01-17
• 公開（公告）號: CN106841138B
• 公開（公告）日: 2019-11-26
• 發明（設計）人: 舒緒剛;吳國杰;占峰;林羽;付志歡;梁月娟;邱桂雄;周新華
• 申請（專利權）人: 廣州天科生物科技有限公司;仲愷農業工程學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 44202 廣州三環專利商標代理有限公司
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫<國際申請>=<國際公布>

本發明公開了一種測定富硒酵母中無機硒的含量的方法，包括以下步驟：(1)稱取富硒酵母，向富硒酵母中加入強堿溶液，超聲，使富硒酵母溶解，再進行水浴加熱；其中，所述富硒酵母的質量與強堿溶液中氫氧根離子的物質的量的比為1g：15～35mmol；(2)加熱完后，進行冷卻，再離心，取上清液；(3)調節步驟(2)所得上清液的酸度至pH值為4～5，靜置后過濾，得到濾液；(4)向步驟(3)所得濾液中加入6～12mol/L鹽酸水溶液，煮沸后進行稀釋，采用原子熒光光度計測定稀釋所得溶液中的硒含量。本發明所述的測定無機硒的方法操作簡單，精密度高，回收率好。

技術領域

本發明涉及一種測定硒含量的方法，尤其涉及一種測定富硒酵母中有機硒和無機硒含量的方法。

背景技術

硒具有抗氧化、抗腫瘤等多種生理功能，是動物的重要營養元素之一，廣泛用于飼料添加劑中，硒的主要添加形式有無機亞硒酸鈉鹽和有機硒酵母，亞硒酸鈉毒性高、不易被動物吸收利用，易造成浪費和環境污染，目前大多數地區已被禁止使用，而硒酵母由于其代謝周期長，生物利用率高，毒性低等特點。硒酵母中主要是以-2價存在的硒蛋白、核酸、多脂類的有機硒，和少量的亞硒酸鈉、硒酸鈉。因此，檢測硒酵母中無機硒和有機硒的含量，在飼料安全使用中具有重要意義。

目前，硒酵母作為一種重要飼料添加劑，總硒的測定方法主要有二氨基聯苯紫外分光光度法、原子熒光分光光度法、電感耦合等離子法，其中氫化物原子熒光光度法已引入國家標準法中；有機硒的測定方法目前還沒有唯一標準，報道較多的主要有質譜-高效液相色譜法，衍生-高效液相色譜法，ICP-MS(Rajani Jagtap，2016)或HPLC-HG-AFS(王金榮，2013)等，但這些方法對儀器要求較高，試劑昂貴，一般實驗室難以實現，操作繁瑣，測試周期較長，且成本較高不適合廣泛推廣，此外，還有一些方法采用有機緩沖溶液浸提、透析分離的方法測定有機硒(高建忠，2006)，但這種方法耗時較長。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足之處而提供一種測定時間短、簡單且易于實施的測定富硒酵母中無機硒含量的方法。

本發明的另一目的在于提供一種測定富硒酵母中有機硒含量的方法。

為實現上述目的，本發明所采取的技術方案為：

一種測定富硒酵母中無機硒的含量的方法，包括以下步驟：

(1)稱取富硒酵母，向富硒酵母中加入強堿溶液，超聲，使富硒酵母溶解，再進行水浴加熱；其中，所述富硒酵母的質量與強堿溶液中氫氧根離子的物質的量的比為1g：15～35mmol(即按照每克富硒酵母中加入15～35mmol強堿溶液的比例，向富硒酵母中加入強堿溶液；其中，強堿溶液中強堿的物質的量按強堿中氫氧根離子的物質的量計)；

(2)加熱完后，進行冷卻，再離心，取上清液；

(3)調節步驟(2)所得上清液的酸度，至上清液的pH值為4～5，靜置后過濾，得到濾液；

(4)向步驟(3)所得濾液中加入6～12mol/L的鹽酸水溶液，煮沸后進行稀釋，采用原子熒光光度計測定稀釋所得溶液中的無機硒的含量。

作為本發明所述測定富硒酵母中無機硒的含量的方法的優選實施方式，其中，在所述步驟(1)中，所述強堿溶液為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液中的至少一種。更優選地，所述強堿溶液為氫氧化鈉溶液。更優選地，所述氫氧化鈉水溶液的濃度為0.15～0.35mol/L，更優選地，所述氫氧化鈉水溶液的濃度為0.25mol/L。值得注意的是，氫氧化鈉的濃度對硒酵母中無機硒的提取效果影響較大，經過大量的實驗，發明人發現當氫氧化鈉水溶液的濃度在0.15～0.35mol/L的范圍內，都能取得較為理想的提取效果。