[發(fā)明專(zhuān)利]尖孢鐮刀菌株及其在制備3β，7α，15α-三羥基雄甾-5-烯-17-酮中的應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710027452.2 | 申請(qǐng)日： | 2017-01-13 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN106591155B | 公開(kāi)（公告）日： | 2019-07-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 單麗紅;劉宏民;姜冬冬;趙沙沙;喬星;張璐佳 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 鄭州大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N1/14 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N1/14;C12P33/12;C12P33/06;C12R1/77 |
| 代理公司： | 鄭州聯(lián)科專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 時(shí)立新 |
| 地址： | 450001 河南*** | 國(guó)省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 鐮刀 菌株 及其 制備 15 羥基 17 中的 應(yīng)用 | ||
1.尖孢鐮刀菌在制備3β，7α，15α-三羥基雄甾-5-烯-17-酮中的應(yīng)用，其特征在于，通過(guò)如下方法實(shí)現(xiàn)：
（1）斜面培養(yǎng)：葡萄糖30 g/L，蛋白胨12 g/L，酵母膏1 g/L，磷酸二氫鉀2 g/L，瓊脂30g/L， pH 4.5，121℃滅菌20分鐘，滅菌后冷卻，制成斜面，接種尖孢鐮刀菌菌株，30℃培養(yǎng)5天，作為斜面活化種子；所述尖孢鐮刀菌（
（2）初始發(fā)酵培養(yǎng)：麥芽糖26.5 g/L，蛋白胨14.5 g/L，酵母膏0.2 g/L，磷酸二氫鈉1g/L，pH5，121℃滅菌20分鐘，滅菌后冷卻；將尖孢鐮刀菌菌株用接種針從斜面上取三接種環(huán)菌絲接種在含有100 mL發(fā)酵培養(yǎng)基的500mL錐形瓶中，菌絲接種量25mL，于30℃，搖床轉(zhuǎn)速210 r/min，培養(yǎng)2天，得發(fā)酵液；
（3）底物的添加：將底物DHEA溶于丙酮中，以100 mg/瓶的濃度加入到含上述發(fā)酵液的500 mL錐形瓶中，發(fā)酵液裝入量100 mL，30℃、210 r/min發(fā)酵反應(yīng)96小時(shí)；
(4) 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的后處理：反應(yīng)結(jié)束后，將菌體與轉(zhuǎn)化清液分離，用乙酸乙酯分別萃取菌體與清液3次，合并乙酸乙酯，在乙酸乙酯相中依次加入飽和碳酸氫鈉溶液、飽和氯化鈉溶液、蒸餾水進(jìn)行洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥后再將乙酸乙酯進(jìn)行減壓蒸餾，得到淡黃色固體，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物經(jīng)柱層析分離，得3β，7α，15α-三羥基雄甾-5-烯-17-酮。
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