[發明專利]鴨病毒性肝炎二價蛋黃抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710026081.6
• 申請日: 2012-12-11
• 公開（公告）號: CN106854647B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 張許科;孫進忠;白朝勇
• 申請（專利權）人: 普萊柯生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N15/41;C07K14/085;C07K16/10;C07K16/02;A61K39/42;A61K39/125;A61P31/14
• 代理公司: 北京華夏正合知識產權代理事務所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

本發明提供了一種鴨病毒性肝炎二價蛋黃抗體及其制備方法，該二價蛋黃抗體包含鴨病毒性肝炎DHAV?1型和鴨病毒性肝炎DHAV?3型蛋黃抗體，該制備方法包括：(1)采用鴨病毒性肝炎DHAV?1型毒株和DHAV?3型毒株分別接種SPF雞胚和易感鴨胚，然后收獲尿囊液，將該收獲的病毒液按比例混合，甲醛滅活并制備疫苗；(2)使用該疫苗免疫產蛋雞，免疫后抽樣測定雞高免蛋黃中抗DHAV?1型、DHAV?3型抗原抗體中和效價≥1∶8192，之后收集該雞的高免蛋；(3)將該高免蛋蛋殼消毒，收集蛋黃后加入等體積蒸餾水，攪拌混勻，低溫巴氏滅活；酸化蒸餾水法提純、辛酸法提純；微濾，超濾。本發明提供的二價蛋黃抗體，成本低，效價高，可對DHAV?1和DHAV?3引起的鴨病毒性肝炎做到有效的控制，可獲得顯著的社會效益。

本申請為專利申請201210530208.5的分案申請，原案發明名稱為“鴨病毒性肝炎二價蛋黃抗體及其制備方法和應用”，申請日為2012年12月11日。

技術領域

本發明涉及一種高免疫蛋黃抗體，具體地說，涉及一種鴨病毒性肝炎的蛋黃抗體。

背景技術

鴨病毒性肝炎(Duck Virus Hepatitis，DVH)是由小RNA病毒科腸病毒屬的鴨肝炎病毒(Duck Hepatitis Virus，DHV)引起雛鴨的一種急性、高度致死性、烈性傳染病。本病常年發生，自然狀態下只感染3周齡內的雛鴨，常造成重大的經濟損失，威脅著養鴨業的健康發展。世界動物衛生組織(OIE)將鴨病毒性肝炎劃歸為B類動物疾病。

鴨肝炎病毒有歷史上分為血清型Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型，三者間沒有抗原相關性。其中I型鴨病毒性肝炎呈世界性分布。II型鴨病毒性肝炎是1965年發現于英國，且自20世紀80年代中期暴發后，該地區也再未見該病的發生。III型1969年發現于美國紐約長島地區。II型、III型目前已被重新分類為鴨星狀病毒屬成員，分別稱為鴨星狀病毒1型(duck astrovirus1，DAstV-1)、鴨星狀病毒2型(DAstV-2)。2009年，國際病毒分類委員會(The InternationalCommittee on Taxonomy of Viruses，ICTV)在小RNA病毒科中新成立禽肝病毒屬(Avihepatovirus)，傳統的血清I型鴨肝炎病毒屬于其中的鴨甲型肝炎病毒(DHAV)，被稱為DHAV-1，DHAV還包括另外兩個血清型即DHAV-2、DHAV-3，DHAV-2和DHAV-3分別與DHAV-1無血清交叉中和作用。Wang L等(2008)則按基因分型稱之為A型(DHAV-A)、B型(DHAV-B)、C型(DHAV-C)。研究表明，根據衣殼蛋白編碼序列所區分的基因型與采用中和試驗所區分的血清型存在對應關系。

國內外學者就DHV血清型的流行狀況開展了研究。2007年，Tseng從1989-1990年臺灣地區暴發鴨病毒性肝炎的病鴨體內分離病原，通過中和試驗證明是一株新型鴨肝炎病毒，N-DHV(可稱作DHAV-2)，目前僅發現于臺灣地區。2007年，韓國Kim等從2003年和2004年暴發鴨病毒性肝炎的病鴨體內分離到一株病毒，與DHV-Ⅰ的血清型不同，稱為DHV-AP(又稱作DHAV-3)。