[發明專利]一種鬼鲉精子超低溫冷凍保存方法在審
| 申請號: | 201710019488.6 | 申請日: | 2017-01-11 |
| 公開(公告)號: | CN108293978A | 公開(公告)日: | 2018-07-20 |
| 發明(設計)人: | 王昭凱;林祥志;楊善軍;陳水波 | 申請(專利權)人: | 國家海洋局第三海洋研究所 |
| 主分類號: | A01N1/02 | 分類號: | A01N1/02 |
| 代理公司: | 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204 | 代理人: | 張松亭;游學明 |
| 地址: | 361000 福*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 精子 超低溫冷凍保存 超低溫冷凍 冷凍保存劑 體積比 稀釋液 葡萄糖 長期保存 液氮保存 抗凍劑 質量比 | ||
本發明公開了一種鬼鲉精子超低溫冷凍保存方法,其中,超低溫冷凍稀釋液按照質量比,包括:NaCl,7.8?8.2g/L;KCl,0.3?0.5g/L;CaCl2,0.1?0.2g/L;NaHCO3,0.3?0.5g/L;KH2PO4,0.04?0.08g/L;MgCl2·6H2O,0.08?0.15g/L;MgSO4·7H2O,0.08?0.12g/L;Na2HPO4·2H2O,0.04?0.08g/L;葡萄糖,8.0?12.0g/L;pH=6.70?6.90。方法包括超低溫冷凍稀釋液和抗凍劑,按體積比,兩者的體積比為8?10:1混合成冷凍保存劑,鬼鲉精子和冷凍保存劑按體積比例1:2~3混合,進行液氮保存。本發明方法適用于長期保存鬼鲉精子。
技術領域
本發明屬于海洋生物技術領域,為一種鬼鲉精子超低溫冷凍保存的方法。
背景技術
鬼鲉為硬骨魚綱、鲉形目Scorpaeniformes、鲉亞目Scorpaenoidei、毒鲉科Synanceiidae、鬼鲉屬Inimicus魚類的統稱,俗稱虎魚。鬼鲉屬魚類為棘毒魚中毒性較強的一類,廣泛分布于中國沿海,是近海底層小型魚類。其中日本鬼鲉肉質細嫩,肉味極其鮮美,烹調主要以湯燉為主,其湯有清涼解毒作用,可用于治療瘡癤腫,整魚食用無任何毒性,鬼鲉已成為出口創匯的經濟魚類之一。近年來因過度捕撈,鬼鲉的野生資源急劇減少,急需開展資源保護和人工增養殖研究。本方法簡單便捷,適于生產上作為種源,為保存野生鬼鲉和具有生長、抗病等優良性狀的人工培育鬼鲉雄魚精子,應用于選擇育種而降低時間、空間的限制,并對鬼鲉種質資源的保護具有重要意義。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種鬼鲉精子超低溫冷凍稀釋液及保存方法。
本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為:
鬼鲉精子超低溫冷凍稀釋液,按照質量比,包括:
NaCl,7.8-8.2g/L;KCl,0.3-0.5g/L;CaCl2,0.1-0.2g/L;NaHCO3,0.3-0.5g/L;KH2PO4,0.04-0.08g/L;MgCl2·6H2O,0.08-0.15g/L;MgSO4·7H2O,0.08-0.12g/L;Na2HPO4·2H2O,0.04-0.08g/L;葡萄糖,8.0-12.0g/L;pH=6.70-6.90。
在本發明的優選實施例中,所述的一種鬼鲉精子超低溫冷凍稀釋液,按照質量比,包括:
NaCl,8.01g/L;KCl,0.40g/L;CaCl2,0.14g/L;NaHCO3,0.35g/L;KH2PO4,0.06g/L;MgCl2·6H2O,0.10g/L;MgSO4·7H2O,0.10g/L;Na2HPO4·2H2O,0.06g/L;葡萄糖,10.00g/L;pH=6.80。
本發明的又一技術方案為:
鬼鲉精子超低溫冷凍保存劑,包括超低溫冷凍稀釋液和抗凍劑,按體積比,兩者的體積比為8-10:1,其中,
1)超低溫冷凍稀釋液,按照質量比,包括:
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