[發(fā)明專利]一種鬼鲉精子超低溫冷凍保存方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710019488.6
• 申請(qǐng)日: 2017-01-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108293978A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王昭凱;林祥志;楊善軍;陳水波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號(hào): A01N1/02
• 分類號(hào): A01N1/02
• 代理公司: 廈門市首創(chuàng)君合專利事務(wù)所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭;游學(xué)明

1.鬼鲉精子超低溫冷凍稀釋液，按照質(zhì)量比，包括：

NaCl,7.8-8.2g/L；KCl,0.3-0.5g/L；CaCl₂,0.1-0.2g/L；NaHCO₃,0.3-0.5g/L；KH₂PO₄,0.04-0.08g/L；MgCl₂·6H₂O,0.08-0.15g/L；MgSO₄·7H₂O,0.08-0.12g/L；Na₂HPO₄·2H₂O,0.04-0.08g/L；葡萄糖，8.0-12.0g/L；pH＝6.70-6.90。

2.如權(quán)利要求1所述的一種鬼鲉精子超低溫冷凍稀釋液，其特征在于：按照質(zhì)量比，包括：

NaCl,8.01g/L；KCl,0.40g/L；CaCl₂,0.14g/L；NaHCO₃,0.35g/L；KH₂PO₄,0.06g/L；MgCl₂·6H₂O,0.10g/L；MgSO₄·7H₂O,0.10g/L；Na₂HPO₄·2H₂O,0.06g/L；葡萄糖，10.00g/L；pH＝6.80。

3.鬼鲉精子超低溫冷凍保存劑，包括超低溫冷凍稀釋液和抗凍劑，按體積比，兩者的體積比為8-10:1，其中，

1)超低溫冷凍稀釋液，按照質(zhì)量比，包括：

NaCl,7.8-8.2g/L；KCl,0.3-0.5g/L；CaCl₂,0.1-0.2g/L；NaHCO₃,0.3-0.5g/L；KH₂PO₄,0.04-0.08g/L；MgCl₂·6H₂O,0.08-0.15g/L；MgSO₄·7H₂O,0.08-0.12g/L；Na₂HPO₄·2H₂O,0.04-0.08g/L；葡萄糖，8.0-12.0g/L；pH＝6.70-6.90；

2)抗凍劑為DMSO。

4.一種鬼鲉精子超低溫冷凍保存方法，包括如下步驟：

1)配置鬼鲉精子超低溫冷凍保存劑，包括超低溫冷凍稀釋液和抗凍劑，按體積比，兩者的體積比為8-10:1，其中，

a)超低溫冷凍稀釋液，按照質(zhì)量比，包括：

NaCl,7.8-8.2g/L；KCl,0.3-0.5g/L；CaCl₂,0.1-0.2g/L；NaHCO₃,0.3-0.5g/L；KH₂PO₄,0.04-0.08g/L；MgCl₂·6H₂O,0.08-0.15g/L；MgSO₄·7H₂O,0.08-0.12g/L；Na₂HPO₄·2H₂O,0.04-0.08g/L；葡萄糖，8.0-12.0g/L；pH＝6.70-6.90；

b)抗凍劑為DMSO；

2)從鬼鲉親魚中挑出性腺成熟的雄魚采集精子，鬼鲉精子和鬼鲉精子超低溫冷凍保存劑，按體積比1：2～3混合；

3)將精子和抗凍稀釋液放入凍存管，搖勻后置于3-5℃冰箱中平衡15-25min，然后在液氮罐內(nèi)-12℃至-18℃停留8-12min后，再在液氮面停留4-6min，然后投入液氮中保存。

5.如權(quán)利要求4所述的一種鬼鲉精子超低溫冷凍保存方法，其特征在于：所述鬼鲉精子通過(guò)擠壓生殖孔方法或采用解剖性腺的方法采集到精子。