[發(fā)明專利]一株具有降低膽固醇和抗氧化活性的胚芽乳桿菌SR9?3及用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710018122.7
• 申請日: 2017-01-11
• 公開（公告）號: CN106754542A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡萍;張玉龍;樊敏;羅沅
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A61K35/747;A61P3/06;A61P39/06;A61P37/04;A61P1/00;A23L33/135;C12R1/25
• 代理公司: 貴陽東圣專利商標(biāo)事務(wù)有限公司52002
• 代理人: 盧俊

1.一株具有降低膽固醇和抗氧化活性的胚芽乳桿菌SR9-3，其特征是：從貴州少數(shù)民族傳統(tǒng)發(fā)酵酸肉中分離得到的乳酸菌，經(jīng)抗氧化試驗并鑒定過的乳酸菌，鑒定結(jié)果為胚芽乳桿菌(Lactobacillus plantarum) SR9-3，于2016年9月26日在中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏編號為CCTCC No: M 2016529；是一種功能性乳酸菌，特別在降低膽固醇和抗氧化方面具有良好的特性，對膽固醇雞蛋黃源的膽固醇去除率為21.98%，添加1%卵磷脂培養(yǎng)基中的膽固醇去除率為31.84%；抗氧化方面，總還原能力為24.62%，DPPH·和·OH清除能力分別為46.32%、257.92%，抗脂質(zhì)過氧化能力為67.13%。

2.如權(quán)利要求1所述的一株具有降低膽固醇和抗氧化活性的胚芽乳桿菌SR9-3的篩選方法，其特征是：包括以下步驟：

（1）實驗室分離、篩選并鑒定出的乳酸菌中的胚芽乳桿菌SR9-3，該菌株分離篩選自貴州少數(shù)民族傳統(tǒng)發(fā)酵酸肉中，用MRS肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)；

（2）通過酶沉淀法、鄰苯二甲醛比色法鑒定篩選得到抗氧化活性菌株具有降膽固醇能力；

（3）通過總還原能力、DPPH·和·OH自由基清除能力以及抗脂質(zhì)過氧化能力檢驗得出該菌株具有良好的抗氧化能力；

（4）通過產(chǎn)酸能力、耐酸能力、耐膽鹽能力、耐滲透壓能力以及抗菌活性的檢驗進行復(fù)篩，確定該菌株是否具有良好的產(chǎn)酸能力、是否耐受胃腸道環(huán)境、是否抑制致病菌，達到益生作用；具有良好的產(chǎn)酸能力、較強的耐酸、耐膽鹽和耐滲透壓能力以及抗菌能力。

3.如權(quán)利要求2所述的一株具有降低膽固醇和抗氧化活性的胚芽乳桿菌SR9-3的篩選方法，其特征是：所述步驟（2）中，所述酶沉淀法的步驟是：在普通的MRS肉湯培養(yǎng)基中加入2%的瓊脂和5%的牛黃脫氧膽酸TDCA，劃線培養(yǎng)乳酸菌，具有膽鹽水解酶活性的乳酸菌菌落會呈現(xiàn)乳白菌落或白色菌落，即為具有降膽固醇能力的乳酸菌；

所述鄰苯二甲醛比色法的步驟是將菌株分別接種于含有2.5%雞蛋黃膽固醇來源的MRS液體培養(yǎng)基和膽固醇濃度為100μg/mL、含1%卵磷脂的MRS液體培養(yǎng)基中，于37℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后測定其對膽固醇的清除能力，即準(zhǔn)確吸取不同體積的膽固醇工作液于潔凈的試管中，再以無水乙醇將體積補至1mL并用氮氣吹干，然后向各試管中加入鄰苯二甲醛OPA指示劑2mL，并于室溫下靜置10min；再向其中加入1mL濃硫酸，混合均勻后室溫靜置10min，空白對照以1mL無水乙醇代替膽固醇溶液，于波長550nm測定吸光值，以膽固醇濃度為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進行比色。