[發明專利]一株具有降低膽固醇和抗氧化活性的胚芽乳桿菌SR9?3及用途

在審

• 申請號: 201710018122.7
• 申請日: 2017-01-11
• 公開（公告）號: CN106754542A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 胡萍;張玉龍;樊敏;羅沅
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A61K35/747;A61P3/06;A61P39/06;A61P37/04;A61P1/00;A23L33/135;C12R1/25
• 代理公司: 貴陽東圣專利商標事務有限公司52002
• 代理人: 盧俊

技術領域

本發明涉及一種微生物，進一步來說，涉及一株能夠降低膽固醇和抗氧化功能的胚芽乳桿菌(Lactobacillus plantarum)SR9-3，及其篩選方法和工業用途。

背景技術

醫學研究證明，人體血清膽固醇含量升高被認為是誘發動脈粥樣硬化、冠心病等心血管疾病的最主要危險因素之一。臨床研究也表明，正常血清膽固醇水平為 5.20mmol/L，超過正常值的1mmol，冠心病發生幾率增加35%，而減少1%的血清膽固醇水平可能降低2%-3%的患病風險。此外，活性氧自由基等會引起機體代謝異常，從而造成一些疾病。

益生菌(Probiotics)是一類能夠改善宿主特定部位微生物平衡并兼有其他益生生理功能的微生物，這類微生物可以通過改善腸道微生物的平衡來控制腸道菌群紊亂引起的腸道疾病，具有抗氧化活性，也能夠降低膽固醇水平，也可通過對乳的發酵進而改善乳糖不耐癥人群對乳糖的利用，能夠通過非特異性或特異性免疫反應，增強免疫作用。益生菌制品中活菌應當代謝穩定，活性強，經過消化道能夠大量存活并在腸道內定植而發揮益生功能。當前應用于生產益生菌劑的優良乳酸菌主要有乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、乳球菌屬中部分菌種等。

乳酸菌(lactic acid bacteria, LAB)是一類能夠利用糖類物質產生主要產物之一的乳酸的一類細菌的通稱。它們在自然界分布廣泛，且有豐富的物種多樣性。

隨著人們日常生活水平的提高，日常飲食的雜亂以及人們對健康的追求，功能產品的需求逐漸增加，例如益生菌發酵乳產品、發酵肉制品等，不僅要求有良好的風味和滋味，更要有一定的功能特性。因此，尋找相對安全且具有良好發酵特性和良好功能活性的乳酸菌發酵劑勢在必行。

目前，中國專利數據庫中，涉及具有降膽固醇功能的胚芽乳桿菌的申請件不多，主要有 CN201010034128.1號《一株具有降膽固醇功能的胚芽乳桿菌及其應用》、CN201080045298.8《胚芽乳桿菌菌株用作降血膽固醇試劑》、CN201410272956.7《一株具有降低膽固醇能力的胚芽乳桿菌》、CN201510223068.0《一株具有降解膽固醇功能的胚芽乳桿菌L01及其應用》、CN201510038278.2《一種降膽固醇胚芽乳桿菌菌制劑發酵泡菜的方法》以及CN201510039808.5《一種降膽固醇胚芽乳桿菌I4增菌培養基響應面優化方法》等；而涉及具有抗氧化功能的胚芽乳桿菌的申請件也不多，主要有CN201510419415.7《一株具高抗氧化活性的胚芽乳桿菌及其應用》、CN201610188977.X《一株高抗氧化耐膽鹽耐酸胚芽乳桿菌JR4及其應用》等。盡管有這些申請件，但僅單一涉及降膽固醇或抗氧化抗氧化功能。

然而，涉及具有降膽固醇和清除自由基的胚芽乳桿菌的專利申請件僅有CN201610182616.4《一株有效去除膽固醇和自由基的胚芽乳桿菌及其應用》，但并未涉及產酸性能、耐滲透壓特性及抑菌特性，抗氧化方面，此件也未涉及到總還原能力和抗氧化能力的檢驗，該申請件中膽固醇測定方法采用P-Fe-S試劑顯色法。研究已有報道，P-Fe-S法受很多因素影響，且檢測結果不穩定。

發明內容

本發明結合降膽固醇和抗氧化能力兩個內容進行篩選研究，篩選的菌種來源是選自少數民族原生態傳統發酵酸肉制品。本發明的目的是提供一株具有良好降低膽固醇和抗氧化功能的胚芽乳桿菌(Lactobacillus plantarum) SR9-3，以期將其開發為優良發酵制劑、保健食品或藥品，使其能夠具有降膽固醇和抗氧化的功能。

本發明另一目的是提供上述降膽固醇和抗氧化乳酸菌的篩選方法，使其具備特定的工業用途。

為達到上述目的，本發明提供的一株具有降低膽固醇和抗氧化活性的胚芽乳桿菌是從貴州少數民族傳統發酵酸肉中分離得到的乳酸菌，經抗氧化試驗并鑒定過的乳酸菌，鑒定結果為胚芽乳桿菌(Lactobacillus plantarum) SR9-3，于2016年9月26日在中國典型培養物保藏中心保藏，保藏編號為CCTCC No: M 2016529。保藏地址為中國武漢武漢大學。

所述一株具有降低膽固醇和抗氧化活性的胚芽乳桿菌的篩選方法，包括以下步驟：

（1）實驗室分離、篩選并鑒定出的乳酸菌中的胚芽乳桿菌SR9-3，該菌株分離篩選自貴州少數民族傳統發酵酸肉中，用MRS肉湯培養基培養；

（2）通過酶沉淀法、鄰苯二甲醛比色法鑒定篩選得到抗氧化活性菌株具有降膽固醇能力；