[發(fā)明專利]ctDNA的數(shù)字化深度測(cè)序技術(shù)

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710017802.7
• 申請(qǐng)日: 2017-01-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106701956A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李福根;熊磊;陳閱軍;湯先念;金其煌;覃灝;許青
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海思路迪生物醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11;C40B50/06
• 代理公司: 北京中創(chuàng)陽(yáng)光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司11003
• 代理人: 尹振啟

1.用于cfDNA建庫(kù)的含有數(shù)字信號(hào)的接頭，所述含有數(shù)字信號(hào)的接頭包括兩種接頭序列，所述兩種接頭序列是在下述的P5和P7接頭序列的基礎(chǔ)上進(jìn)行序列修飾得到的：

P5：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3'

P7：5'-GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCACATCACG-index-ATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3'；

其中：

兩種接頭序列中的一種是多種序列的混合物，組成混合物的每種序列分別是在上述P5接頭序列的5'端第29位的C和第30位的A之間插入n堿基隨機(jī)序列得到的序列且每種序列中的n堿基隨機(jī)序列各不相同，兩種接頭序列中的另一種是上述P7接頭序列；或者

兩種接頭序列中的一種是多種序列的混合物，組成混合物的每種序列分別是用n堿基隨機(jī)序列取代上述P7接頭序列中的index序列得到的序列且每種序列中的n堿基隨機(jī)序列各不相同，兩種接頭序列中的另一種是上述P5接頭序列；

其中n是選自2-9的任一個(gè)數(shù)字。

2.權(quán)利要求1的含有數(shù)字信號(hào)的接頭在cfDNA建庫(kù)中的應(yīng)用。

3.cfDNA建庫(kù)方法，包括下述步驟：

(1)末端修復(fù)；

(2)將權(quán)利要求1的含有數(shù)字信號(hào)的接頭連接至經(jīng)過(guò)末端修復(fù)的cfDNA片段的兩端；

(3)文庫(kù)擴(kuò)增與純化。

4.cfDNA建庫(kù)試劑盒，所述試劑盒包括權(quán)利要求1的含有數(shù)字信號(hào)的接頭。

5.權(quán)利要求4的試劑盒，還包括cfDNA建庫(kù)所需的一種或多種其它試劑。