[發明專利]一種單純皰疹病毒II型IgM抗體的免疫層析檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201710008363.3
• 申請日: 2017-01-05
• 公開（公告）號: CN106771193B
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 陳立國;鄒偉權;張亞麗;李慶祥;母潤紅;王濤;蘇焱
• 申請（專利權）人: 廣州華弘生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577
• 代理公司: 廣州勝沃園專利代理有限公司44416
• 代理人: 張帥

1.一種單純皰疹病毒II型IgM抗體的免疫層析檢測試劑盒，所述試劑盒由試劑條和塑料卡組裝而成，所述試劑條包括底板，所述底板上粘貼有帶有檢測線和質控線的反應膜，所述反應膜靠近檢測線的一端依次疊加粘貼有膠體金墊、樣品墊，所述反應膜靠近質控線的一端疊加粘貼有吸收墊，所述反應膜上檢測線包被了單純皰疹病毒II型抗原，所述反應膜上質控線包被了羊抗鼠IgG抗體，所述膠體金墊上包被了膠體金標記的鼠抗人IgM單克隆抗體，其特征在于：

所述反應膜由以下方法制得：用緩沖液將單純皰疹病毒II型抗原稀釋至包被濃度為0.8~1.2mg/ml，將羊抗鼠IgG抗體稀釋至包被濃度為1.5~1.8mg/ml，在反應膜上分別劃線單純皰疹病毒II型抗原檢測線和羊抗鼠IgG抗體質控線，劃線后將反應膜置于干燥間，溫度20~25℃，濕度小于30%，干燥4~5小時；

所述膠體金墊由以下方法制得：以氯金酸-檸檬酸三鈉還原法制備直徑為20nm的膠體金溶液，制備完成后取100ml膠體金液放在燒杯內，用0.2M K₂CO₃調至pH8.0，按100ml膠體金溶液加入2.0mg鼠抗人IgM單克隆抗體，再緩慢添加0.2M K₂CO₃將膠體金溶液調至pH9.5，添加K₂CO₃的時間為5分鐘，然后室溫攪拌30分鐘，加入終濃度為10mg/ml牛血清白蛋白，1mg/ml聚乙烯吡咯烷酮封閉20~30分鐘，12000r/m離心30分鐘，棄上清，用緩沖液復溶至50ml，按1ml溶液鋪20cm²的比例均勻地鋪在玻璃纖維膜上，再置于干燥間，溫度20~25℃，濕度小于30%，干燥4~5小時；

所述緩沖液由以下方法制得：稱取0.06g的NaH₂PO₄·2H₂O和0.58g的Na₂HPO₄·12H₂O，加純化水80.0mL，攪拌使充分溶解后加入0.80~0.90g的NaCl和0.5~2.0g烷基糖苷，充分混勻，定容至100ml，測定pH值為7.5~8.0；

所述烷基糖苷的碳鏈長度為C8~C10。

2.如權利要求1所述單純皰疹病毒II型IgM抗體的免疫層析檢測試劑盒，其特征在于，所述反應膜為硝酸纖維素膜。

3.如權利要求1所述單純皰疹病毒II型IgM抗體的免疫層析檢測試劑盒，其特征在于，所述樣品墊為玻璃纖維膜。