[發(fā)明專利]經(jīng)修飾的CCP抗原及其用途和抗CCP抗體檢測試劑盒及其制造方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710006139.0
• 申請日: 2017-01-03
• 公開（公告）號: CN108267576B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發(fā)明（設計）人: 饒微;魏亞慶;袁錦云;劉蕾;李婷華;許然
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學工程股份有限公司
• 主分類號: C07K7/50
• 分類號: C07K7/50;G01N33/533
• 代理公司: 深圳市盈方知識產(chǎn)權(quán)事務所(普通合伙) 44303
• 代理人: 楊賢

1.一種經(jīng)修飾的CCP抗原，所述CCP抗原具有下式I所示的序列：

其特征在于，式I中的谷氨酸E的羧羥基被R基團取代，

所述R基團選自以下一種或多種：甲基氧基，戊氧基，乙酰胺基和乙酰肼基。

2.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)修飾的CCP抗原用于制備抗CCP抗體檢測試劑的用途。

3.一種抗CCP抗體檢測試劑盒，所述試劑盒包括組分A和組分B，其特征在于，

所述組分A包括磁性微球，所述磁性微球被與蛋白載體偶聯(lián)的權(quán)利要求1或2所述的經(jīng)修飾的CCP抗原包被，

所述組分B包括被鼠抗人IgG二抗標記的發(fā)光標記物溶液。

4.如權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述發(fā)光標記物選自：魯米諾、異魯米諾及其衍生物,辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶。

5.如權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述蛋白載體選自：牛血清白蛋白(BSA)，陽離子牛血清白蛋白(cBSA)，血藍蛋白(KLH)，卵清蛋白(OVA)，人血清白蛋白(HSA)，牛γ球蛋白和人γ球蛋白。

6.如權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒滿足以下一項或多項：

磁性微球的工作濃度為1-10mg/mL；

所述經(jīng)修飾的CCP抗原的工作濃度為50-100ng/mL；

所述蛋白載體的工作濃度為10-40ng/mL；

所述鼠抗人IgG二抗的工作濃度為100-300ng/mL；

所述發(fā)光標記物的工作濃度為10-30ng/mL。

7.一種抗CCP抗體檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，包括：

1).使權(quán)利要求1或2所述的經(jīng)修飾的CCP抗原與蛋白載體偶聯(lián)；

2).使步驟1)獲得的偶聯(lián)物包被磁性微球，得到組分A；

3).使鼠抗人IgG二抗和發(fā)光標記物反應，得到組分B；

4).將組分A和組分B組裝成試劑盒。

8.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，

所述經(jīng)修飾的CCP抗原與蛋白載體的摩爾比為20:1-80:1；和/或

所述磁性微球與偶聯(lián)物的重量比為1mg：10μg–1mg：40μg。

9.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)包括使所述CCP抗原與交聯(lián)劑在催化劑存在下進行反應，隨后加入所述蛋白載體。

10.如權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，

所述交聯(lián)劑選自：戊二醛、BS(PEG)5、BS(PEG)8、PEG400、PEG800和丁二酸酐；和/或

所述催化劑選自：三乙胺、吡啶、氫氧化鉀和碳酸鉀。