[發明專利]一種有機液態奶的鑒別方法

在審

• 申請號: 201710003501.9
• 申請日: 2017-01-04
• 公開（公告）號: CN106841428A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 徐曉云;李亞男;李慧;潘思軼
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司42104
• 代理人: 徐紹新

1.一種有機液態奶的鑒別方法，其特征在于包括以下步驟：

1)樣品提取：將待測樣品用醇溶液進行震蕩提取，提取液氮氣吹干后用甲酸水溶液復溶，然后經0.22um濾膜過濾；

2)UPLC-MS檢測：將濾液經色譜分離并采用質譜檢測分析，得到樣本的原始代謝圖譜，其中，色譜分離采用的是HSS T3色譜柱，流動相是甲酸水溶液與乙腈，采用梯度洗脫；

3)對原始代謝圖譜進行分析，從而鑒別有機液態奶。

2.如權利要求1所述的有機液態奶的鑒別方法，其特征在于：所述待測樣品在提取前還有進行脫脂處理的步驟。

3.如權利要求2所述的有機液態奶的鑒別方法，其特征在于：所述脫脂處理的方法是先將待測樣品進行超聲破乳，然后離心脫脂。

4.如權利要求1所述的有機液態奶的鑒別方法，其特征在于：所述醇溶液為甲醇。

5.如權利要求1所述的有機液態奶的鑒別方法，其特征在于：所述甲酸水溶液的質量濃度為0.1％。

6.如權利要求5所述的有機液態奶的鑒別方法，其特征在于：所述梯度洗脫的程序、流速及流動相中各成分的體積百分比為：

7.如權利要求1所述的有機液態奶的鑒別方法，其特征在于：所述質譜檢測的條件是：電噴霧離子化，采用ESI+模式檢測，毛細管電壓1.0KV，錐孔電壓30.0V，錐孔氣流速50L/h，源溫度150℃，霧化氣溫度550℃，霧化氣流速1000L/h，以MS^E為采集模式，低碰撞能量4eV，高碰撞能量10-50eV，采集質量范圍50-1200m/z，應用亮氨酸-腦啡肽作為鎖定質量，正離子模式下產生[M+H]⁺離子556.2771Da。

8.如權利要求1所述的有機液態奶的鑒別方法，其特征在于：步驟3)中，將樣本的原始代謝圖譜采用Progenesis QI軟件導入，進行峰對齊，峰提取，去卷積預處理，再對導出的數據依次進行PCA、PLS-DA、OPLS-DA模式識別方法分析，建立多維統計模型，可視化地顯示有機液態奶與普通牛奶的代謝譜差異，并采用模型的VIP值，結合學生氏t檢驗的p值篩選獲得差異代謝物，并對這些物質進行初步鑒定。