[發(fā)明專利]用于聽力喪失綜合征的動(dòng)物模型及其治療方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680091790.6
• 申請(qǐng)日: 2016-12-22
• 公開（公告）號(hào): CN110099999B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱敏生;朱光潔
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/09
• 分類號(hào): C12N15/09;C12N15/06;A01K67/027
• 代理公司: 江蘇瑞途律師事務(wù)所 32346
• 代理人: 陳彬;蔣海軍

本公開涉及一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其基因組包含Pou4f3基因的破壞。在一些實(shí)施例中，所述轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出相較于野生型小鼠的聽力降低和/或表現(xiàn)出DFNA15疾病的癥狀。一些實(shí)施例涉及一種減輕受試者的所述DFNA15疾病的一種或多種癥狀的方法。例如，所述方法包含向所述受試者施用一定量的抑制所述受試者的視黃酸信號(hào)傳導(dǎo)途徑的試劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開一般涉及用于進(jìn)行性聽覺(jué)喪失的動(dòng)物模型，并且特別涉及用于DFNA15疾病的動(dòng)物模型及其治療方法。

背景技術(shù)

進(jìn)行性聽覺(jué)喪失是影響大部分人群的由遺傳和環(huán)境損害導(dǎo)致的最常見的感覺(jué)缺陷 之一。盡管普遍存在，但到目前為止，減輕聽覺(jué)喪失的方法仍非常少。明確耳聾的病理和分子變化可能為潛在的治療發(fā)展提供新的見解。

在遺傳性聽覺(jué)障礙中，20％的病例是非綜合征性聽覺(jué)喪失的常染色體顯性遺傳(ADNSHL)，這可能是由對(duì)應(yīng)于59個(gè)基因座的至少35個(gè)基因中的突變引起的 (http://hereditaryhearingloss.org)。常染色體顯性耳聾-15(DFNA15)是進(jìn)行性非綜合征 性感覺(jué)神經(jīng)性聽覺(jué)喪失的一種形式，在生命的第二個(gè)和第六個(gè)十年之間語(yǔ)后發(fā)作。盡管 有人提出一個(gè)或多個(gè)基因的突變可能與DFNA15有關(guān)，但尚未確定直接的基因到表型證 據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

本公開的實(shí)施例涉及一種轉(zhuǎn)基因小鼠模型，其基因組包含Pou4f3基因的破壞。在一些實(shí)施例中，所述轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出相較于野生型小鼠的聽覺(jué)能力降低的聽覺(jué)能力和 /或表現(xiàn)出DFNA15疾病的癥狀。

一些實(shí)施例進(jìn)一步涉及一種測(cè)試試劑對(duì)DFNA15疾病的一種或多種癥狀的治療功效的方法。在一些實(shí)施例中，所述方法可以包含將一種或多種待測(cè)試的試劑應(yīng)用于其基 因組可以包含Pou4f3基因的破壞的轉(zhuǎn)基因小鼠。在一些情況下，所述轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn) 出相較于野生型小鼠的聽覺(jué)能力降低的聽覺(jué)能力和/或表現(xiàn)出DFNA15疾病的癥狀。此 外，可以確定DFNA15疾病的一種或多種癥狀是否由于應(yīng)用所述一種或多種試劑而改 變。

一些實(shí)施例涉及一種用于制備轉(zhuǎn)基因小鼠的方法。在一些實(shí)施例中，所述方法可以 包含破壞小鼠的胚胎干細(xì)胞中的Pou4f3基因以生成從小鼠分離的胚胎干細(xì)胞或體細(xì)胞， 以生成胚胎。所述方法可以進(jìn)一步包含將所述胚胎干細(xì)胞或所述胚胎轉(zhuǎn)移到受體雌性小 鼠中，使得所述轉(zhuǎn)基因小鼠的基因組可以包含Pou4f3基因的破壞。在某些實(shí)施例中， 所述轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出相較于野生型小鼠的聽覺(jué)能力降低的聽覺(jué)能力和/或表現(xiàn)出 DFNA15疾病的癥狀。

在一些實(shí)施例中，所述Pou4f3基因的破壞可以包含Pou4f3基因的雜合破壞，并且

在一些實(shí)施例中，所述Pou4f3基因的破壞可以包含Pou4f3基因的純合破壞，并且所述轉(zhuǎn)基因小鼠不表達(dá)野生型Pou4f3基因。

在一些實(shí)施例中，所述Pou4f3基因的破壞可以包含Pou4f3基因的一個(gè)或多個(gè)核苷酸的純合或雜合缺失和Pou4f3基因的C/T轉(zhuǎn)換。

在一些實(shí)施例中，所述Pou4f3基因的破壞是Pou4f3基因的外顯子2的一部分的缺失。在某些實(shí)施例中，所述轉(zhuǎn)基因小鼠的Pou4f3基因的外顯子1未被破壞。

在一些實(shí)施例中，所述DFNA15疾病的所述癥狀可以包含進(jìn)行性聽覺(jué)喪失和平衡能力受損中的至少一種。

在一些實(shí)施例中，所述一種或多種試劑可以包含調(diào)節(jié)Espin表達(dá)的試劑。

在一些實(shí)施例中，所述調(diào)節(jié)Espin表達(dá)的試劑與視黃酸信號(hào)傳導(dǎo)途徑相關(guān)。

在一些實(shí)施例中，一種或多種測(cè)試可以包含在應(yīng)用所述一種或多種試劑之前和之后 對(duì)所述轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行的聽性腦干反應(yīng)(ABR)、畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射(DPOAE)和轉(zhuǎn)棒 測(cè)試中的至少一種。此外，可以確定所述一種或多種測(cè)試的結(jié)果是否由于應(yīng)用所述一種 或多種試劑而改變。