[發明專利]酵母細胞

有效

• 申請號: 201680081026.0
• 申請日: 2016-12-22
• 公開（公告）號: CN108603213B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: T.沃格;A.戈利埃德
• 申請（專利權）人: 合成生物制品有限責任公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12N15/63;C12N1/19;C12R1/84
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝;易方方

1.一種Komagataella屬酵母細胞，所述細胞包含可通過解阻遏誘導的甲基營養型酵母細胞的直系同源啟動子或其變體，其中所述直系同源啟動子是甲基營養型酵母細胞的直系同源甲酸脫氫酶(FMD)啟動子,其中所述直系同源啟動子包含核酸序列SEQ ID No.1及其變體，所述變體包含選自下組的核酸序列：SEQ ID No.35、SEQ ID No.36、SEQ ID No.37、SEQID No.38、SEQ ID No.39、SEQ ID No.40、SEQ ID No.41、SEQ ID No.42、SEQ ID No.43、SEQID No.44、SEQ ID No.45、SEQ ID No.46、SEQ ID No.47、SEQ ID No.48、SEQ ID No.49、SEQID No.50、SEQ ID No.51、SEQ ID No.52、SEQ ID No.53、SEQ ID No.54、SEQ ID No.55和SEQ ID No.56，

其中所述直系同源啟動子與編碼異源或同源多肽的核酸分子可操作地連接。

2.根據權利要求1所述的酵母細胞，其中所述直系同源啟動子是可用甲醇誘導的。

3.根據權利要求1或2所述的酵母細胞，其中所述異源或同源多肽包含信號肽。

4.根據權利要求1或2所述的酵母細胞，其中所述異源或同源多肽包含分泌信號肽。

5.根據權利要求1所述的酵母細胞，其中所述直系同源啟動子來源于多形漢遜酵母(Hansenula polymorpha)。

6.根據權利要求1所述的酵母細胞，其中所述直系同源啟動子和與所述啟動子可操作地連接的編碼所述異源或同源多肽的所述核酸分子存在于基因組中。

7.根據權利要求1所述的酵母細胞，其中所述直系同源啟動子和與所述啟動子可操作地連接的編碼所述異源或同源多肽的所述核酸分子作為染色體外核酸構建體存在。

8.根據權利要求1所述的酵母細胞，其中所述變體包含選自下組的核酸序列：SEQ IDNo.35，SEQ ID No.37，SEQ ID No.39，SEQ ID No.40，SEQ ID No.44，SEQ ID No.51，SEQ IDNo.52，SEQ ID No.54，SEQ ID No.55和SEQ ID No.56。

9.根據權利要求1所述的酵母細胞，其中所述變體包含選自下組的核酸序列：SEQ IDNo.35，SEQ ID No.39，SEQ ID No.44，SEQ ID No.51，SEQ ID No.52，SEQ ID No.54，SEQ IDNo.55和SEQ ID No.56。

10.一種用于生產異源多肽的方法，所述方法包括培養權利要求1至9中任意一項所述的酵母細胞的步驟。

11.根據權利要求10所述的方法，其中在所述培養期間，通過解阻遏條件誘導所述異源多肽的表達或增加其表達速率。

12.根據權利要求10所述的方法，其中在解阻遏條件下的所述培養期間，加入甲醇或替代誘導物。