[發明專利]通過檢測外周血單個核細胞的γ干擾素分泌來診斷恙蟲病的診斷方法

在審

• 申請號: 201680076852.6
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN108474797A
• 公開（公告）日: 2018-08-31
• 發明（設計）人: 李珍洙
• 申請（專利權）人: 仁荷大學校產學協力團
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N15/14;C12N5/0783;C07K16/24
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 苗堃;金世煜

1.一種恙蟲病(scrub typhus)診斷方法，其特征在于，

包括：

(a)步驟，從預要判斷是否受到恙蟲病東方體(Orientia tsutsu gamushi)感染的患者分離出血液或者外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cell；PBMC)的步驟；

(b)步驟，將恙蟲病東方體提取物處理到所述(a)步驟中分離的血液或者外周血單個核細胞，以進行抗原刺激的步驟；及

(c)步驟，檢測從外周血單個核細胞中所分泌出來的γ-干擾素(interferon-γ；INF-γ)的濃度，以判斷是否被恙蟲病東方體感染的步驟。

2.根據權利要求1所述的恙蟲病診斷方法，其特征在于，

所述(b)步驟中，

恙蟲病東方體提取物選自吉列姆株(Gilliam strain)、卡普株(Karp strain)、保寧株(Boryoung strain)、卡托株(Kato strain)及川崎株(Kawasaki strain)組成的群中的1種以上的菌株提取。

3.根據權利要求1所述的恙蟲病診斷方法，其特征在于，

所述(b)步驟中，

恙蟲病東方體提取物，包括：56kDa型特異性抗原(56kDa type specific antigen；TSA)。

4.根據權利要求1所述的恙蟲病診斷方法，其特征在于，

所述(b)步驟為，

將0.5-10μg/ml濃度的恙蟲病東方體提取物處理于外周血單個核細胞中，反應時間為12-24小時。

5.根據權利要求1所述的恙蟲病診斷方法，其特征在于，

所述(c)步驟中，

γ-干擾素的濃度可通過ELISA方法、流式細胞分析(flow cyto metry)、ELISPOT或者實時PCR進行檢測。

6.根據權利要求1所述的恙蟲病診斷方法，其特征在于，

當所述(c)步驟中所檢測的γ-干擾素的濃度高于非感染者時，則可判斷為是被恙蟲病東方體感染。

7.根據權利要求1所述的恙蟲病診斷方法，其特征在于，

γ-干擾素從外周血單個核細胞所包含的CD3+T細胞或者CD56+NK細胞(naturalkiller cell)中生成。

8.利用權利要求1至權利要求7的任一項的恙蟲病診斷方法的恙蟲病診斷試劑盒，其特征在于，

包括：

恙蟲病東方體提取物；及

抗-γ-干擾素(anti-interferon-γ；anti-INF-γ)抗體。