[發明專利]銅綠假單胞菌PCRV連接的抗原疫苗

有效

• 申請號: 201680075151.0
• 申請日: 2016-10-19
• 公開（公告）號: CN108778322B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: C.M-P.S.J.費龍;S.J.克姆勒;M.T.科瓦里克;J.L.克巴特
• 申請（專利權）人: 葛蘭素史密絲克萊恩生物有限公司
• 主分類號: A61K39/104
• 分類號: A61K39/104;A61K39/385;C07K14/21;A61P31/04;A61K39/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 梁謀;周齊宏

本發明公開了包含共價連接至銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)PcrV載體蛋白的抗原（例如糖抗原）的綴合物，所述銅綠假單胞菌PcrV載體蛋白包含與SEQ?ID?NO：1?4的序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，其中所述抗原（直接或通過接頭）連接至銅綠假單胞菌PcrV載體蛋白的氨基酸殘基。本發明還公開了含有糖基化位點共有序列的銅綠假單胞菌PcrV蛋白。

技術領域

本發明涉及以下領域：基于綴合物的免疫原性組合物和疫苗、其制備以及此類組合物在醫學中的用途。更具體而言，其涉及PcrV作為來自銅綠假單胞菌（ Pseudomonas?aeruginosa）的新的載體蛋白的用途。PcrV可以用作其他抗原的載體蛋白，特別是糖抗原或其他缺乏T細胞表位的抗原。PcrV載體蛋白可以作為載體蛋白和本身作為抗原。

背景

長久以來，已經建立了T非依賴性抗原與載體蛋白的綴合作為使T細胞幫助成為正常T非依賴性抗原的免疫應答的一部分的一種方式。以這種方式，可以通過允許免疫記憶的發展和應答的加強能力(boostability)來增強免疫應答。已經通過將細菌莢膜糖與載體蛋白綴合而開發出的成功的綴合疫苗是本領域已知的；載體蛋白具有將T非依賴性多糖抗原變成能夠引發免疫記憶應答的T依賴性抗原的已知作用。例如，WO?02/58737公開了包含與載體蛋白綴合的來自腦膜炎奈瑟球菌（ N.?meningitidis）血清組A、C、W135和Y的純化莢膜多糖的疫苗。

本領域已知幾種載體蛋白，其中破傷風類毒素、白喉類毒素、CRM197和來自流感嗜血桿菌（ Haemophilus?influenzae）的蛋白D在商品化疫苗中用作載體蛋白。白喉毒素和包括CRM197在內的突變體形式也已作為糖類安全有效的T細胞依賴性載體被用于疫苗中。CRM197目前用于流感嗜血桿菌b型寡糖CRM197綴合疫苗中（HibTitre?；Lederle?PraxisBiologicals，Rochester，N.Y.）。

由假單胞菌的菌株（例如銅綠假單胞菌）感染引起的疾病是全世界的主要威脅。雖然正在開發針對這種感染的疫苗，但仍然非常需要能夠大量安全生產的針對假單胞菌感染的有效疫苗。

本發明提供了一種新的載體蛋白。傳統上，銅綠假單胞菌PcrV蛋白質不被用作載體蛋白。本文公開了這樣的綴合物，其中PcrV蛋白作為糖抗原的載體蛋白且另外本身作為抗原，從而產生針對PcrR的中和免疫應答，并且產生對LPS的調理應答。

因此，在本發明的一個方面中，提供了包含共價連接至銅綠假單胞菌PcrV載體蛋白的抗原的綴合物，所述銅綠假單胞菌PcrV載體蛋白包含與SEQ?ID?NO：1-4的序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中抗原（直接或通過接頭）連接至銅綠假單胞菌PcrV載體蛋白的氨基酸殘基。

根據本發明的第二方面，提供了具有與SEQ?ID?NO：1-4的序列具有至少80％同一性的氨基酸序列的PcrV蛋白，所述氨基酸序列包含D/E-X-N-X-S/T共有序列，其中X是除脯氨酸外的任何氨基酸。

根據本發明的另一方面，提供了包含本發明的綴合物或PcrV蛋白和藥學上可接受的賦形劑的免疫原性組合物。

根據本發明的另一方面，提供了制備本發明的免疫原性組合物的方法，其包括將本發明的綴合物或PcrV蛋白與藥學上可接受的賦形劑混合的步驟。

根據本發明的另一方面，提供了用于治療感染的根據本發明的綴合物或PcrV蛋白，并且使用根據本發明的PcrV蛋白的綴合物的治療方法是本發明的另一方面。