[發(fā)明專利]牛血清組合物和使用所述牛血清組合物作為添加劑培養(yǎng)細胞的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201680066959.2 | 申請日： | 2016-11-16 |
| 公開（公告）號： | CN108291202A | 公開（公告）日： | 2018-07-17 |
| 發(fā)明（設計）人： | 山原研一;須藤薰雄;須藤稔太;廣島友治 | 申請（專利權(quán)）人： | 山原研一 |
| 主分類號： | C12N5/078 | 分類號： | C12N5/078;C12N5/077;A61K35/19;A61K35/16;A61K35/17 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 王媛媛;萬雪松 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 日本;JP |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 牛血清 血小板 白細胞 體液因子 白膜層 抗凝處理 抗凝全血 培養(yǎng)細胞 細胞增殖 抗凝劑 凝固劑 可用 全血 制備 分泌 添加劑 凝固 激活 血液 釋放 | ||
1.牛血清組合物的制備方法，所述方法包括：
用抗凝劑進行牛全血的抗凝處理的步驟，
從抗凝牛全血獲得白膜層和比重比白膜層比重大的級分的步驟，和
在給定的溫度下促進和激活所得白細胞和血小板之間的相互作用達不少于給定的時間以引起從白細胞和/或血小板中分泌或釋放體液因子，并用再凝固劑進行包含體液因子的血液組分的再凝固處理的步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其中所述比重比白膜層比重大的級分是比重為1.071 -1.084的級分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的制備方法，其中所述給定的溫度為環(huán)境溫度至40℃并且時間為不少于5 min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項的制備方法，其進一步包括通過加入玻璃材料激活白膜層。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項的制備方法，其中所述抗凝劑為檸檬酸鈉或檸檬酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的制備方法，其中所述再凝固劑為氯化鈣溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項的制備方法，其中所述白膜層通過離心機或連續(xù)離心機獲得。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項的制備方法，其中所述體液因子為TGF-β1、堿性FGF、嗜酸性粒細胞趨化因子、G-CSF、IFN-γ、IL-10、IL-12 (p70)、IL-13、IL-1RA、IL-1b、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IP-10、MCP-1、PDGF-BB或TNF-α。
9.牛血清組合物，其通過下列方式獲得：用抗凝劑進行牛全血的抗凝處理，從抗凝全血獲得白膜層和比重比白膜層比重大的級分，在環(huán)境溫度至40℃的溫度下促進和激活所得白細胞和血小板之間的相互作用達不少于5 min以引起從白細胞和/或血小板中分泌或釋放體液因子，和用再凝固劑對其進行再凝固。
10.培養(yǎng)顯示優(yōu)異增殖能力的細胞的方法，所述方法包括使用通過根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項的制備方法獲得的牛血清組合物作為添加劑。
11.培養(yǎng)不容易誘導血液凝固的細胞的方法，所述方法包括使用通過根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項的制備方法獲得的牛血清組合物作為添加劑誘導組織因子途徑抑制劑的表達。
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11的方法，其中所述細胞為間充質(zhì)干細胞或間充質(zhì)細胞，其來源于骨髓、脂肪組織或包括羊膜和臍帶的胎兒附屬物。
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