[發(fā)明專利]用于HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌、非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥及其高級(jí)別前期病變的ZIC1和GHSR分子診斷標(biāo)志物在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201680059636.0 | 申請(qǐng)日： | 2016-08-25 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN108368552A | 公開(kāi)（公告）日： | 2018-08-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | A·T·黑塞林克 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 塞爾夫斯庫(kù)林有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6886 | 分類號(hào)： | C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京德琦知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11018 | 代理人： | 潘懷仁;王珍仙 |
| 地址： | 荷蘭阿*** | 國(guó)省代碼： | 荷蘭;NL |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 誘導(dǎo) 肛門生殖器 婦科癌癥 浸潤(rùn)性癌 病變 超甲基化 癌癥 高級(jí)別 檢測(cè) 分子診斷 標(biāo)志物 甲基化 試劑盒 基因 癌變 浸潤(rùn) 細(xì)胞 | ||
1.一種用于檢測(cè)HPV誘導(dǎo)的高級(jí)別癌變前病變和HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌以及非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥的方法，所述方法包括檢測(cè)細(xì)胞中GHSR和/或ZIC1基因的超甲基化，由此這樣的超甲基化指示存在具有浸潤(rùn)潛力的HPV誘導(dǎo)的前期病變、HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌和非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述HPV誘導(dǎo)的高級(jí)別癌變前病變或HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌是高級(jí)別癌前宮頸病變或浸潤(rùn)性宮頸癌.
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌是高風(fēng)險(xiǎn)HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌.
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥是子宮內(nèi)膜癌。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述超甲基化在如圖1和圖2所示的富含CpG序列中檢測(cè)。
6.一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)檢測(cè)HPV誘導(dǎo)的高級(jí)別癌變前病變和HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌以及非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥或肛門生殖器癌癥的方法，其中所述超甲基化是與可比較的正常細(xì)胞相比，測(cè)試細(xì)胞中GHSR和/或ZIC1的富含CpG啟動(dòng)子和/或基因序列中增加的甲基化。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中試劑是選自由BssHII、MspI、NotI和HpaII組成的組中的甲基化敏感性限制性核酸內(nèi)切酶。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述方法涉及納米技術(shù)，優(yōu)選芯片上實(shí)驗(yàn)室技術(shù)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中進(jìn)行甲基化特異性PCR，其基于DNA的亞硫酸氫鹽修飾，然后進(jìn)行靶向富含CpG序列的特異性PCR反應(yīng)。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述試劑是與如圖1或圖2所示的核酸結(jié)合的核酸探針或引物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述核酸探針或引物具有可檢測(cè)的標(biāo)記。
12.根據(jù)權(quán)利要求9、10或11所述的方法，其中所述核酸探針具有選自由以下組成的組中的核苷酸序列：
a)能夠在嚴(yán)格條件下與圖1所示的序列ZIC1或圖2所示的序列GHSR雜交的多核苷酸序列；
b)與a)的多核苷酸中的一種具有至少70％同一性的多核苷酸；
c)與a)的多核苷酸中的一種互補(bǔ)的多核苷酸；以及
d)包括a)或b)的多核苷酸中的一種的至少15個(gè)堿基的多核苷酸。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的方法，其中確定所述GHSR和ZIC1基因的所述甲基化。
14.GHSR和/或ZIC1作為用于檢測(cè)HPV誘導(dǎo)的高級(jí)別癌變前病變或HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌或非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥或肛門生殖器癌癥的分子診斷標(biāo)志物的用途，優(yōu)選地其中所述標(biāo)志物的甲基化預(yù)測(cè)所述病變、癌或癌癥的發(fā)生。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述細(xì)胞來(lái)源于尿樣本或?qū)m頸樣本。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述宮頸樣本是自樣本。
17.在檢測(cè)HPV誘導(dǎo)的高級(jí)別癌變前病變或HPV誘導(dǎo)的浸潤(rùn)性癌或非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥或肛門生殖器癌癥的方法中使用的零件的試劑盒，所述試劑盒包括：
用于檢測(cè)GHSR和/或ZIC1甲基化的裝置，其中所述裝置包括對(duì)于圖1的ZIC1核苷酸序列和/或圖2的GHSR核苷酸序列特異性的探針和/或引物；
用于檢測(cè)HPV感染的裝置，其中所述裝置包括對(duì)于HPV特異性的探針和引物。
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