[發(fā)明專利]用于HPV誘導(dǎo)的浸潤性癌、非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥及其高級別前期病變的ZIC1和GHSR分子診斷標志物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680059636.0
• 申請日: 2016-08-25
• 公開（公告）號: CN108368552A
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: A·T·黑塞林克
• 申請（專利權(quán)）人: 塞爾夫斯庫林有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 北京德琦知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11018
• 代理人: 潘懷仁;王珍仙

本發(fā)明涉及用于檢測HPV誘導(dǎo)的高級別癌變前病變、HPV誘導(dǎo)的浸潤性癌和非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥的方法，所述方法包括檢測細胞中ZIC1和/或GHSR基因中的超甲基化，由此這樣的超甲基化指示存在具有浸潤潛力的HPV誘導(dǎo)的前期病變、HPV誘導(dǎo)的浸潤性癌和非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥。本發(fā)明進一步包括ZIC1和/或GHSR基因在用于檢測ZIC1和/或GHSR甲基化的這樣的方法和試劑盒中的用途。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及癌癥預(yù)防和醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域；并涉及用于癌癥，尤其是人乳頭瘤病毒(HPV)誘導(dǎo)的浸潤性癌及其高級別前期病變，比如浸潤性宮頸癌和癌變前宮頸病變、非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥的分子診斷標志物。尤其，本發(fā)明涉及ZIC1和GHSR基因組調(diào)控序列作為hrHPV誘導(dǎo)的浸潤性癌、非HPV誘導(dǎo)的婦科癌癥和肛門生殖器癌癥及其具有浸潤潛力的癌前病變的標志物的用途。

背景技術(shù)

宮頸癌是世界范圍內(nèi)女性第四大常見癌癥，并且每年造成大約250,000例癌癥死亡。

宮頸鱗狀細胞癌的發(fā)展特征在于一系列癌變前病變，即所謂的宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(CIN)，其分級為1至3級，分別指輕度非典型增生(CIN1)、中度非典型增生(CIN2)和重度非典型增生/原位癌(CIN3)。CIN1也被稱為低級別鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)并且CIN2和CIN3一起被稱為高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)。對于宮頸腺癌，原位腺癌(ACIS)是確定的前期病變。原則上，這些癌變前病變是可逆的，但是病變越嚴重，自發(fā)性消退的機會就越低。宮頸癌被認為是可預(yù)防的疾病，因為癌前階段可以通過脫落細胞學(xué)檢測，并且在必要時治療相對容易，僅有輕微副作用。宮頸篩查的目的是早期診斷高級別癌前病變(即，CIN2/3和原位腺癌)和可治療的癌性病變，從而降低浸潤性宮頸癌的死亡率。一般的醫(yī)療實踐包括治療所有形態(tài)學(xué)證實的CIN2、CIN3和原位腺癌的女性，以便防止宮頸癌的發(fā)展。

在過去的十年中，已經(jīng)確定了宮頸癌發(fā)生是由感染高風險人乳頭瘤病毒(hrHPV)引發(fā)的。已經(jīng)顯示分別干擾p53和Rb腫瘤抑制劑途徑的病毒癌基因E6和E7的表達對腫瘤發(fā)生和惡性表型的維持兩者都是必需的。因此，對hrHPV進行測試看起來是有吸引力的初步篩查工具。然而，與癌發(fā)生的多階段過程相一致，hrHPV感染的細胞向浸潤性癌細胞發(fā)展要求宿主細胞基因組中額外的改變。只有一小部分感染高風險HPV的女性將發(fā)展為高級別癌前宮頸病變(CIN2/3)，并且如果不治療，則發(fā)展為宮頸癌。在大多數(shù)患有宮頸癌變前病變的女性中，該病變自發(fā)性消退。在參與基于人群的篩查的女性中，約5％-6％測試為陽性hrHPV.然而，她們中最多只有20％(1％的參與女性)患有≥CIN2/3。因此，通過hrHPV測試的初級篩查將伴隨大量冗余的后續(xù)程序和女性不必要的焦慮，除非可將標志物適用于允許將hrHPV陽性的女性分級為≥CIN2/3和≥原位腺癌風險的宮頸涂片。

主要的挑戰(zhàn)是將HPV測試為陽性的女性的百分比降低到那些具有臨床意義病變的患者。一種模式是使用細胞學(xué)作為用于hrHPV陽性女性的二級(所謂分類)測試。盡管如此，這仍使得大量細胞學(xué)正常的hrHPV陽性女性(篩查人群中3.5％的女性)中仍有10％的患有或獲得≥CIN3.此外，細胞學(xué)對于可以在家中采取的自采樣的宮頸陰道樣本行不通，因為這些樣本不代表宮頸的細胞學(xué)狀態(tài)。另一種模式是使用HPV16/18基因分型.然而，這使得非HPV16/18型的女性盡管程度較輕但也存在≥CIN2/3和≥原位腺癌的風險。因此，需要補充或可替換的分類工具，以將hrHPV陽性女性分級為患有或未患有≥CIN2/3和≥原位腺癌的hrHPV陽性女性。