[發明專利]融合蛋白

有效

• 申請號: 201680058895.1
• 申請日: 2016-09-05
• 公開（公告）號: CN108472356B
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: R.瓦倫塔;C.科尼利厄斯
• 申請（專利權）人: 維拉瓦克斯股份公司
• 主分類號: A61K39/29
• 分類號: A61K39/29;A61K39/36;C12N15/62;A61P31/20
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 余曉文;張曉飛

本發明涉及用于治療和/或預防乙肝病毒感染的融合蛋白，其包含與至少一種由氨基酸序列組成的肽融合的至少一種乙肝病毒PreS多肽或其片段，所述氨基酸序列與選自SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4的序列具有至少80％的同一性。

本發明涉及用于治療和/或預防乙肝病毒(HBV)感染的融合蛋白。

乙肝是由乙肝病毒引起的肝臟疾病。該疾病每年影響全世界數百萬人。 HBV存在于感染者的血液和體液中，因此可以通過使這些液體與健康人的液體接觸而傳播。

HBV主要通過在肝細胞中復制來干擾肝臟的功能。在HBV感染期間，宿主免疫應答引起肝細胞損傷和病毒清除兩者。

急性HBV感染通常得不到治療，因為大多數人都能自發清除感染。然而，為了降低肝硬化和肝癌的風險，必須治療慢性HBV感染。目前用于治療HBV 感染的抗病毒藥物包括拉米夫定、阿德福韋、替諾福韋(tenofovir)、替比夫定(telbivudine)和恩替卡韋。此外，作為免疫系統調節劑的干擾素α-2a也可用于治療。但是，這些藥物都不能清除HBV感染。這些藥物只能阻止HBV復制，從而使肝損傷最小化。

本發明的目的是提供治療和/或預防HBV感染的新方法，其克服了當前 HBV治療的缺點。一個特別重要的目標是通過恢復有效的體液和細胞免疫應答來對慢性感染患者中的HBV進行病毒清除。

這些目的通過用于治療和/或預防乙肝病毒感染的融合蛋白來實現，所述融合蛋白包含與至少一種由氨基酸序列組成的肽融合的至少一種乙肝病毒 PreS多肽或其片段，所述氨基酸序列與選自SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4的序列具有至少80％同一性。

令人驚訝地證明，包含乙肝病毒PreS多肽或其片段和至少一種由氨基酸序列組成的融合蛋白與單獨的PreS或包含與SEQ ID No.1，SEQ ID No.2，SEQ ID No.3和SEQ IDNo.4不同的肽的其它融合蛋白相比以高得多的程度誘導個體中PreS特異性抗體的形成。此外，響應施用本發明的融合蛋白而產生的抗體顯示出優異的乙肝中和作用并且能夠抑制乙肝病毒感染。第一次發現，包含PreS的融合蛋白的施用可以成功地用于治療和/或預防人類受試者中的乙肝病毒感染。

如圖2B所示，本發明的融合蛋白的施用導致形成抗體，所述抗體特異性針對HBVPreS的前30個(肽P1)和50個(肽P2)氨基酸殘基，在更低程度上針對 HBV PreS的C末端區域(肽P6到P8)以及在忽略不計的程度上針對中心部分 (肽P4和P5)。由于HBV PreS的N端部分已知在HBV的肝細胞附著和HBV感染中起重要作用，針對PreS多肽的這部分的抗體在治療和/或預防HBV感染中特別有用。與此相反，僅施用HBV PreS不顯示這些效果。由此產生的抗體能夠結合HBV PreS的幾乎任何部分(參見圖2A)。這顯示由本發明的融合蛋白誘導的免疫應答更集中于涉及HBV感染的HBV PreS多肽的那些部分。

本發明的融合蛋白可以包含一種或多種乙肝病毒PreS蛋白多肽或其一種或多種片段。融合蛋白中超過一種乙肝病毒PreS多肽或其片段的存在具有以下優點：向免疫系統呈遞更多抗原，允許形成甚至更多針對PreS的抗體。在本發明的特別優選的實施方案中，融合蛋白包含1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10種乙肝病毒PreS多肽或其片段。如本文定義為本發明融合蛋白的一部分的HBV PreS多肽以及它們的片段可以源自相同的HBV基因型或不同的基因型。例如，本發明的融合蛋白可以僅包含HBV基因型A的PreS多肽或其片段，或者可以與源自HBV基因型B、C、D、E、F或F、G或H的其它PreS多肽或其片段組合。