[發明專利]含Fc蛋白的表達

有效

• 申請號: 201680054785.8
• 申請日: 2016-09-21
• 公開（公告）號: CN108138147B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: B·哈利;Z·胡;J·C·喬利;A·Y·沈;B·R·斯奈德克爾
• 申請（專利權）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;A61K39/00;C07K16/00;C12N15/79;C12N15/85
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

1.一種用于產生包含C末端賴氨酸的含Fc蛋白的哺乳動物宿主細胞，其中與包含不具有CpD基因失活的野生型CpD基因的宿主細胞相比，所述宿主細胞具有至少60％的羧肽酶D（CpD）表達水平降低，其中所述宿主細胞包含表達載體，所述表達載體包含編碼所述包含C末端賴氨酸的含Fc蛋白的核酸，其中所述宿主細胞是中國倉鼠卵巢（CHO）細胞。

2.根據權利要求1的宿主細胞，其中所述含Fc蛋白是抗體。

3.根據權利要求2的宿主細胞，其中所述抗體是單克隆抗體。

4.根據權利要求1的宿主細胞，其中所述含Fc蛋白是含Fc的融合蛋白。

5.根據權利要求1的宿主細胞，其中所述宿主細胞中的CpD基因被失活。

6.根據權利要求5的宿主細胞，其中所述含Fc蛋白是抗體或是含Fc的融合蛋白。

7.根據權利要求6的宿主細胞，其中所述CpD基因通過siRNA失活。

8.根據權利要求6的宿主細胞，其中所述CpD基因通過shRNA失活。

9.根據權利要求6的宿主細胞，其中所述CpD基因通過基因缺失而失活。

10.根據權利要求6的宿主細胞，其中所述CpD基因通過基因添加或取代而失活。

11.根據權利要求9或10的宿主細胞，其中所述CpD基因使用成簇的規律間隔的短回文重復序列（CRISPR）系統失活。

12.根據權利要求9或10的宿主細胞，其中使用轉錄激活因子樣效應物核酸酶（TALEN）系統使CpD基因失活。

13.根據權利要求9或10的宿主細胞，其中使用鋅指核酸酶（ZFN）系統使CpD基因失活。

14.根據權利要求9或10的宿主細胞，其中使用大范圍核酸酶系統使CpD基因失活。

15.根據權利要求1的宿主細胞，其包含表達載體，所述表達載體包含編碼所述含Fc蛋白的核酸，其中所述含Fc蛋白具有脯氨酸-甘氨酸-賴氨酸的C末端序列。

16.一種細胞培養系統，其包含權利要求1-15中任一項所述的宿主細胞。

17.生產權利要求1-15中任一項的宿主細胞的方法，其中所述方法包括使宿主細胞中的CpD基因失活，從而產生該宿主細胞。

18.根據權利要求17的方法，其中使用siRNA系統使CpD基因失活。

19.根據權利要求17的方法，其中使用shRNA系統使CpD基因失活。

20.根據權利要求17的方法，其中通過基因缺失使CpD基因失活。

21.根據權利要求17的方法，其中通過基因添加或取代使CpD基因失活。

22.根據權利要求20或21的方法，其中使用CRISPR系統使CpD基因失活。

23.根據權利要求20或21的方法，其中使用TALEN系統使CpD基因失活。

24.根據權利要求20或21的方法，其中使用ZFN系統使CpD基因失活。