[發明專利]用于制備源自血漿的乙型肝炎免疫球蛋白的方法

有效

• 申請號: 201680039211.3
• 申請日: 2016-06-02
• 公開（公告）號: CN107849086B
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發明（設計）人: 辛庸源;樸東日;安忠模;金鐘卿;李東揮
• 申請（專利權）人: 株式會社綠十字控股
• 主分類號: C07K1/18
• 分類號: C07K1/18;C07K1/34;B01D15/36;C07K16/10;A61K39/395
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 陳桉

本發明涉及一種源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白制劑的制備方法。更具體地，本發明涉及一種源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白制劑的制備方法，其特征在于含有人乙型肝炎免疫球蛋白的血漿蛋白組分II(組分II)被滲析濃縮，然后通過陰離子交換樹脂和陽離子交換樹脂純化技術去除產生血栓的物質和在過程中形成的雜質。通過使用根據本發明的源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白制劑的制備方法，去除雜質和產生血栓的物質的效率增加，并且保持了聚合物含量，由此可能產生穩定和改善質量的人乙型肝炎免疫球蛋白。

技術領域

本發明涉及一種用于制備源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白制劑的方法，并且更具體地涉及一種用于制備源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白制劑的方法，其包括：滲析和濃縮含有源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白的血漿蛋白組分II；通過陰離子交換樹脂和陽離子交換樹脂純化技術去除血栓形成物質和過程中的雜質；有效去除在病毒滅活過程中加入的溶劑和洗滌劑；以及進行納米過濾和加入穩定劑以增加免疫球蛋白的穩定性。

背景技術

免疫球蛋白，即含有針對各種病毒和細菌的抗體的血漿蛋白，用作通過向自然缺乏抗體的受試者或由于病毒或細菌疾病而需要人工補充抗體的患者施用而預防或治療疾病的藥物。

為了將這種免疫球蛋白用作藥物，根據由Cohn和Oncley開發的冷乙醇分餾工藝(Cohn E.et al.,J.Am.Chem.Soc.,68:459,1946)或由Kistler和Nitschmann開發的經修改的冷乙醇分餾工藝(Kistler P,Nitschmann HS,Vox Sang,7:414.1952)已經制備了用于皮下或肌內注射的免疫球蛋白。

然而，用于肌內注射的免疫球蛋白具有以下問題：1)這種免疫球蛋白的劑量是有限的，使得不可能大量施用免疫球蛋白；2)免疫球蛋白導致注射有免疫球蛋白的部位的疼痛；3)免疫球蛋白具有低含量的有抗體活性的天然免疫球蛋白G(IgG)；4)免疫球蛋白的抗體活性被注射部位的蛋白酶降低；和5)達到峰值血藥濃度耗費的時間是24小時或更久。

為了解決肌內注射的問題，嘗試通過靜脈內注射施用免疫球蛋白。然而，當免疫球蛋白制劑靜脈內施用時，由于具有抗補體活性的聚集體引起的嚴重副作用(過敏反應)，出現各種直接的副作用，包括呼吸困難和循環系統休克。這種癥狀主要出現在免疫球蛋白缺乏的患者中。具體地，在其中出現抗IgA抗體的患者種觀察到嚴重超敏反應的副作用。

換言之，為了開發靜脈內制劑，應當去除雜質，諸如凝血因子(纖維蛋白原、白蛋白、前激肽釋放酶激活劑(PKA)和轉鐵蛋白)或類似于乙型肝炎免疫球蛋白的免疫球蛋白諸如IgA和IgE，并且需要增加穩定性和純度。

因此，由于上述問題，免疫球蛋白的靜脈內注射是不可能的，需要開發用于靜脈內注射的免疫球蛋白制劑，并且已經開發了在制備過程中能夠去除上述聚集體和/或防止聚集體形成的方法。由于使用蛋白酶諸如胃蛋白酶、木瓜蛋白酶或纖溶酶，或者化學物質諸如β-丙內酯處理免疫球蛋白來改變它們的結構從而抑制免疫球蛋白聚集體的形成或破壞免疫球蛋白聚集體，免疫球蛋白的靜脈內注射已經成為可能，從而降低免疫球蛋白的抗補體活性。

第一代靜脈內注射免疫球蛋白(IVIG)產品通過使用胃蛋白酶處理起始原料(Cohn組分II)來制備以去除免疫球蛋白聚集體。制備過程不包括柱色譜步驟，并且將制備的產品凍干，以便在適當的時間段內穩定保持，并且在使用前立即將其溶解。然而，發現由一些制造商制造的IVIG產品導致病毒感染諸如病毒性丙型肝炎。因此，滅活和/或去除已知病毒的一個或多個步驟被加入到制備過程中。此后，具有低抗補體活性和較高穩定性的第二代IVIG產品在1980年代中期被公開，并且IVIG產品通過一些色譜步驟來純化。

這種制劑是靜脈內注射的，并且因此克服了肌內免疫球蛋白的缺點，其包括有限的劑量、注射部位的疼痛和免疫球蛋白的抗體被蛋白酶降低，并且達到峰值血藥濃度耗費的時間也降低到幾個小時或更少。