[發(fā)明專利]用于制備源自血漿的乙型肝炎免疫球蛋白的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680039211.3
• 申請日: 2016-06-02
• 公開（公告）號: CN107849086B
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 辛庸源;樸東日;安忠模;金鐘卿;李東揮
• 申請（專利權(quán)）人: 株式會社綠十字控股
• 主分類號: C07K1/18
• 分類號: C07K1/18;C07K1/34;B01D15/36;C07K16/10;A61K39/395
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494
• 代理人: 陳桉

1.一種用于制備源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白制劑的方法，其包括以下步驟：

(a)溶解含有源自人血漿的乙型肝炎免疫球蛋白的血漿蛋白組分II，其從患有乙型肝炎的或使用乙型肝炎疫苗另外免疫的健康供體收集，然后通過過濾獲得組分II溶液；

(b)滲析和/或濃縮獲得的組分II溶液，使經(jīng)滲析和/或濃縮的溶液經(jīng)過pH為5.5-7.0的陰離子交換色譜，然后回收未附著于用來進(jìn)行陰離子交換色譜的柱的組分；

(c)使用溶劑和/或洗滌劑處理回收的組分以滅活病毒，并且使經(jīng)處理的組分經(jīng)過pH為5.0-6.5的陽離子交換色譜以去除所述溶劑和/或洗滌劑和血栓形成物質(zhì)；

(d)滲析和/或濃縮從所述陽離子交換色譜獲得的洗出液；

(e)過濾所述經(jīng)滲析和/或濃縮的溶液，從而獲得人乙型肝炎免疫球蛋白；

(f)向所述人乙型肝炎免疫球蛋白加入穩(wěn)定劑，并且在加入所述穩(wěn)定劑之后將所述免疫球蛋白溶液的pH調(diào)節(jié)至3.5-4.5；和

(g)使所述pH調(diào)節(jié)的免疫球蛋白溶液進(jìn)行細(xì)菌過濾，并且在所述細(xì)菌過濾后將所述免疫球蛋白溶液的pH調(diào)節(jié)至4.0-4.5，

其中所述步驟(b)的陰離子交換色譜使用基于二乙氨基乙基(DEAE)的陰離子交換樹脂，并且

其中所述步驟(c)中的陽離子交換色譜使用基于Sephardex的陽離子交換樹脂。

2.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(a)中的血漿蛋白組分II的溶解通過加入相當(dāng)于所述血漿蛋白組分體積2-10倍的量的氯化鈉溶液進(jìn)行。

3.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(a)中的過濾是澄清過濾，并且通過將pH調(diào)節(jié)至4.5-5.5進(jìn)行。

4.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(b)中的滲析和/或濃縮在10mOsmol/kg或更低的滲透壓進(jìn)行，然后將pH調(diào)節(jié)至5.5-6.5。

5.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(b)中的陰離子交換色譜回收非吸附溶液。

6.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(b)中的陰離子交換色譜在5.5-7.0的pH和30-150cm/小時的流速進(jìn)行，并且所述未附著于陰離子交換色譜柱的組分以1.0-2.0負(fù)載量(LV)回收。

7.權(quán)利要求1的方法，其中所述溶劑是磷酸三(正丁基)酯(TNBP)，并且所述洗滌劑是選自聚山梨醇酯80、Triton X-100和Triton X-45中的至少一種。

8.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(c)中的陽離子交換色譜在500-1,500mM的鹽濃度進(jìn)行。

9.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(d)中的滲析和/或濃縮在10mOsmol/kg或更低的滲透壓進(jìn)行。

10.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(e)中的過濾在1.5-2.5巴的壓力使用納米過濾系統(tǒng)進(jìn)行。

11.權(quán)利要求1的方法，其中所述穩(wěn)定劑是選自糖醇、麥芽糖、山梨糖醇、甘露糖、葡萄糖、海藻糖、白蛋白、賴氨酸、甘氨酸、PEG和吐溫80中的至少一種。

12.權(quán)利要求1的方法，其中加入所述穩(wěn)定劑，使得最終濃度是90-110g/l。