[發(fā)明專利]用于檢測病毒的改善的組合物和方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201680038604.2
• 申請日: 2016-05-06
• 公開（公告）號: CN108350511A
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳福和;楊文龍;杜啟泓;劉耀南;霍文遜;袁國勇
• 申請（專利權(quán)）人: 新興病毒診斷（香港）有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6816
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 王永偉;丁秀云

1.檢測病毒的方法，包括；

鑒定在合適的宿主細胞被所述病毒感染時以3％和10％之間表達的高度保守的核苷酸測試序列；

合成與所述測試序列至少部分互補的探針序列；

使所述探針序列與所述測試序列雜交以形成雜交復(fù)合體；和

檢測所述雜交復(fù)合體。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述核苷酸測試序列的長度在30和200個核苷酸之間。

3.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述核苷酸測試序列在60和90個核苷酸之間。

4.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述測試序列代表非翻譯區(qū)。

5.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述測試序列在合適的宿主細胞被所述病毒感染時以大于5％被表達。

6.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述核苷酸測試序列包括位于轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列上游的5’非翻譯區(qū)的前導(dǎo)序列。

7.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述探針序列在表1中被鑒定。

8.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述探針序列包括與所述測試序列互補性的0.5％和10％之間的缺少。

9.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述探針序列包括非自然存在的核苷酸。

10.權(quán)利要求9所述的方法，其中所述非自然存在的核苷酸包括LNA。

11.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述探針序列包含可檢測標(biāo)簽。

12.權(quán)利要求11中所述的方法，其中所述可檢測標(biāo)簽選自熒光團、發(fā)色團、旋轉(zhuǎn)標(biāo)簽、放射性同位素、親和表位、和質(zhì)量標(biāo)簽。

13.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述病毒是RNA病毒。

14.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述病毒選自冠狀病毒、星狀病毒科、杯狀病毒科、小核糖核酸病毒科、黃病毒科、反轉(zhuǎn)錄病毒科、披膜病毒科、沙粒病毒科、布尼亞病毒科、絲狀病毒科、正黏病毒科、副黏病毒科、彈狀病毒科、和呼腸病毒科。

15.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述病毒是SARS或MERS的致病因素。

16.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述病毒是流感病毒。

17.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述雜交復(fù)合體包含多核苷酸雙鏈體。

18.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述雜交復(fù)合體包含多核苷酸三鏈體。

19.權(quán)利要求1所述的方法，其中實施該檢測步驟而無外源聚合酶驅(qū)動的擴增步驟。

20.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述檢測步驟還包括擴增步驟，其中使用外源聚合酶復(fù)制至少部分所述測試序列。

21.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述擴增步驟包括PCR。

22.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述擴增步驟包括RT-PCR。

23.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述擴增步驟包括實時RT-PCR。

24.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述擴增步驟包括巢式PCR。