[發(fā)明專利]高功能性血小板的制造方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680035205.0
• 申請(qǐng)日: 2016-06-16
• 公開（公告）號(hào): CN107709546B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 江藤浩之;中村壯;伊東幸敬;重盛智大;堂田丈明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)立大學(xué)法人京都大學(xué);株式會(huì)社美加細(xì)胞
• 主分類號(hào): C12N5/078
• 分類號(hào): C12N5/078;A61K35/19;A61P7/04;C12N15/09;C12N15/113
• 代理公司: 北京銘碩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11286
• 代理人: 齊雪嬌;金玉蘭

1.一種功能性高的血小板生成促進(jìn)劑，其特征在于，包含1種或多種芳香烴受體(ArylHydrocarbon Receptor；AhR)拮抗劑以及1種或多種ROCK(Rho-associated coiled-coilforming kinase：Rho相關(guān)卷曲螺旋形成激酶)抑制劑，AhR拮抗劑選自4-(2-(2-(苯并[b]噻吩-3-基)-9-異丙基-9H-嘌呤-6-基氨基)乙基)苯酚(SR-1)、2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(2-甲基-4-鄰甲苯偶氮-苯基)-酰胺(CH-223191)、N-[2-(3H-吲哚-3-基)乙基]-9-異丙基-2-(5-甲基-3-吡啶基)嘌呤-6-胺(GNF-351)，ROCK抑制劑選自Y27632、Y39983。

2.一種體外的血小板的制造方法，其特征在于，包括使權(quán)利要求1所述的血小板生成促進(jìn)劑與巨核細(xì)胞或其前體細(xì)胞接觸的工序。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述接觸工序在不使用飼養(yǎng)細(xì)胞的條件下進(jìn)行。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在振搖培養(yǎng)條件下實(shí)施。

5.根據(jù)權(quán)利要求2～4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，還包括抑制所述巨核細(xì)胞或其前體細(xì)胞中的HMGA(High Mobility Group At-hook protein：高遷移率族At-hook蛋白)蛋白質(zhì)的表達(dá)或功能的工序。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述HMGA蛋白質(zhì)的表達(dá)或功能的抑制通過直接或間接地抑制HMGA基因的表達(dá)的siRNA或miRNA來進(jìn)行。

7.根據(jù)權(quán)利要求2～4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述巨核細(xì)胞是在與巨核細(xì)胞相比分化程度低的細(xì)胞中，使選自癌基因、多梳基因和細(xì)胞凋亡抑制基因中的至少1個(gè)基因強(qiáng)制表達(dá)之后，解除該強(qiáng)制表達(dá)而得到的細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述與巨核細(xì)胞相比分化程度低的細(xì)胞是由多能性干細(xì)胞制造而成的造血前體細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求2～4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，還包括從所述巨核細(xì)胞中回收血小板的工序。