[發明專利]谷氨酸草酰乙酸轉氨酶1(GOT1)、制劑和產生它們的方法及其用途

在審

• 申請號: 201680031560.0
• 申請日: 2016-03-31
• 公開（公告）號: CN107771217A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: D.米雷曼;A.拉賓科夫;A.魯班;G.喬納;E.哈祖姆;V.布梅里斯;N.馬考斯卡斯;S.蘇德茲尤維伊內;E.納蒙泰特
• 申請（專利權）人: 耶達研究及發展有限公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C07K19/00;C12N15/62;A61K38/45;A61P35/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司72001
• 代理人: 李志強,周李軍

1. 一種包含谷氨酸草酰乙酸轉氨酶1 (GOT1)多肽分子的蛋白制劑，其中100%的GOT1多肽分子在GOT1多肽的第1位具有丙氨酸，并且GOT1多肽分子構成制劑中至少95%的蛋白。

2.權利要求1的蛋白制劑，其中蛋白構成制劑中至少98%的分子。

3.一種藥物組合物，其包含權利要求1或2的蛋白制劑作為活性劑和藥學上可接受的載體。

4. 權利要求1或3的制劑或藥物組合物，其中所述GOT1包含與SEQ ID NO: 2具有至少90%同源性的氨基酸序列。

5. 權利要求1或3的制劑或藥物組合物，其中所述GOT1由SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列組成。

6.一種包含目標多肽和小泛素相關修飾物(SUMO)的融合蛋白，其中所述目標多肽的N末端翻譯融合至所述SUMO的C末端，所述融合蛋白缺少異源親和標簽。

7. 一種包含谷氨酸草酰乙酸轉氨酶1 (GOT1)和小泛素相關修飾物(SUMO)的GOT1融合蛋白，其中所述GOT1的N末端翻譯融合至所述SUMO的C末端，所述融合蛋白缺少親和標簽。

8.權利要求7的融合蛋白，其中所述GOT1在第1位包含丙氨酸。

9.權利要求6或7的融合蛋白，其中所述親和標簽為多聚組氨酸標簽。

10. 權利要求7的融合蛋白，其中所述GOT1的氨基酸序列與SEQ ID NO: 2具有至少90%同源性。

11. 權利要求6或7的融合蛋白，其中所述SUMO的氨基酸序列與SEQ ID NO: 5具有至少90%同源性。

12. 權利要求7的融合蛋白，其包含與SEQ ID NO: 1具有至少90%同源性的氨基酸序列。

13. 權利要求7的融合蛋白，其由SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列組成。

14.權利要求6或7的融合蛋白，其中所述SUMO為酵母SUMO。

15. 權利要求14的融合蛋白，其中所述酵母SUMO為釀酒酵母的mif two 3抑制因子(Smt3)。

16.一種分離的多核苷酸，其編碼權利要求6-15中任一項的融合蛋白。

17. 權利要求16的分離的多核苷酸，其包含與SEQ ID NO: 3具有至少90%同源性的核酸序列。

18.一種核酸構建體，其包含權利要求16或17中任一項的分離的多核苷酸。

19.一種在有需要的受試者中治療與谷氨酸過多有關的疾病或病況的方法，所述方法包括給予受試者治療有效量的權利要求1-5中任一項的制劑或藥物組合物，從而治療所述疾病或病況。

20.權利要求1的蛋白制劑，其用于治療與谷氨酸過多有關的疾病或病況。

21.權利要求3的藥物組合物，其用于治療與谷氨酸過多有關的疾病或病況。

22.權利要求19-21中任一項的方法、制劑或組合物，其中所述疾病或病況為腦疾病或病況。

23.權利要求19-21中任一項的方法、制劑或組合物，其中所述腦疾病為中樞神經系統的癌癥。

24.權利要求23的方法、制劑或組合物，其中所述癌癥為膠質母細胞瘤。

25.權利要求22的方法、制劑或組合物，其中所述腦病況為腦缺血。

26.權利要求19-21中任一項的方法、制劑或組合物，其中所述疾病為神經退行性疾病。

27.一種純化多肽的方法，所述方法包括：

(a) 在宿主細胞內表達包含所述多肽和SUMO的融合蛋白，其中所述多肽的N末端翻譯融合至所述SUMO的C末端，所述融合蛋白缺少異源親和標簽；

(b) 自所述融合蛋白去除所述SUMO；和

(c) 自所述宿主細胞分離所述多肽，從而純化多肽。

28.權利要求27的方法，其中步驟(b)先于步驟(c)實現。