[發(fā)明專利]以高親和性、親合力及特異性結(jié)合轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1的scFv-Fc二聚體

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680025665.5
• 申請(qǐng)日: 2016-03-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107889491B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邱華偉;C·潘;J·博德
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 建新公司
• 主分類號(hào): C07K16/22
• 分類號(hào): C07K16/22;C07K16/00;C07K19/00;A61K39/395;A61P35/00;A61P17/00;A61P13/12
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494
• 代理人: 封新琴

scFv?Fc二聚體選擇性地以高親和性和親合力結(jié)合并中和TGFβ1。scFv區(qū)可以包含與美替木單抗(metelimumab)相同的VH和VL域或CDR區(qū)。cFv?Fc二聚體較小的尺寸，針對(duì)TGFβ1的高選擇性、效力，以及長(zhǎng)的體內(nèi)半衰期的獨(dú)特組合使其成為用于治療應(yīng)用的理想候選物。

相關(guān)申請(qǐng)

本專利申請(qǐng)要求2015年3月4日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)62/128,133的權(quán)益，將其通過(guò)提述整體并入本文。

發(fā)明背景

技術(shù)領(lǐng)域

抗原結(jié)合的二聚體具有兩個(gè)多肽單體，其各自包含單鏈片段可變分子(scFv)、鉸鏈、和Fc分子，所述抗原結(jié)合的二聚體展現(xiàn)出對(duì)于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGFβ1)的高親和性和親合力，但對(duì)于TGFβ2或TGFβ3則無(wú)。還提供了包含所述抗原結(jié)合的二聚體的組合物和使用該組合物來(lái)治療涉及TGFβ1活性的疾病的方法。

背景

許多嚴(yán)重疾病與TGFβ誘導(dǎo)的信號(hào)傳輸途徑機(jī)能障礙有關(guān)。例如，TGFβ的增加的組織水平被認(rèn)為是特發(fā)性肺纖維化和心肌纖維化進(jìn)展中的因素。此外，TGFβ的高局部組織水平可以允許一些類型的癌細(xì)胞的維持和進(jìn)展。因此，TGFβ信號(hào)傳輸?shù)南抡{(diào)可以降低此類腫瘤細(xì)胞的存活力。

TGFβ同種型是～25kDa同型二聚體分子，其具有相似的結(jié)構(gòu)框架，其中兩個(gè)單體經(jīng)二硫橋共價(jià)地連接。哺乳動(dòng)物同種型具有70-82％的序列同一性，但在血管發(fā)育和免疫細(xì)胞功能調(diào)控中具有不重迭的活性。在人中已報(bào)道了三個(gè)TGFβ同種型：TGFβ1、TGFβ2、和TGFβ3(Swiss Prot登錄號(hào)分別為P01137、P08112、和P10600)。TGFβ1和TGFβ3在結(jié)合至兩個(gè)跨膜受體(稱為TGFβ受體I型和II型)的胞外結(jié)構(gòu)域時(shí)觸發(fā)細(xì)胞信號(hào)傳輸級(jí)聯(lián)反應(yīng)。TGFβ2可以結(jié)合至TGFβ受體I型和II型以及TGFβ受體III型。

已針對(duì)臨床使用測(cè)試了能結(jié)合人TGFβ1、TGFβ2、和TGFβ3的抗體。例如，Grütter等公開(kāi)了GC1008(一種人IgG4單克隆抗體(Mab；即GC1008))在臨床開(kāi)發(fā)中用于治療惡性腫瘤和纖維化疾病。Proc.Nat’l Acad.Sci.USA 105(51):20251-56(2008)。GC1008是“泛特異性的”TGFβ中和抗體，因?yàn)槠淠苤泻退腥N人TGFβ同種型。選擇性中和TGFβ1的抗體是公開(kāi)的，例如在美國(guó)專利No.6,492,497和美國(guó)專利No.7,151,169中，其在此通過(guò)提述并入本文。美替木單抗(metelimumab)，又稱CAT192(IgG4)，是一種選擇性中和TGF-β1的人IgG4單克隆抗體。參見(jiàn)例如美國(guó)專利No.6,492,497。測(cè)試美替木單抗用于治療彌散性皮膚系統(tǒng)性硬化病(diffuse cutaneous systemic sclerosis)，又稱硬皮病(scleroderma)，但證明其功效不足。

發(fā)明概述

本發(fā)明提供了結(jié)合TGFβ1的scFv-Fc二聚體，其能選擇性地中和人TGFβ1。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述scFv-Fc二聚體形式為scFv-Fc融合蛋白，其包含或組成為(comprised of)兩個(gè)多肽單體，每個(gè)單體包含單鏈Fv區(qū)(scFv)、鉸鏈、和Fc區(qū)。scFv-Fc二聚體的VH和VL域展現(xiàn)出對(duì)TGFβ1較高的親和性(affinity)和親合力(avidity)，且比以IgG1或IgG4形式使用時(shí)更有效地中和TGFβ1。