[發明專利]以高親和性、親合力及特異性結合轉化生長因子-β1的scFv-Fc二聚體

有效

• 申請號: 201680025665.5
• 申請日: 2016-03-03
• 公開（公告）號: CN107889491B
• 公開（公告）日: 2022-01-07
• 發明（設計）人: 邱華偉;C·潘;J·博德
• 申請（專利權）人: 建新公司
• 主分類號: C07K16/22
• 分類號: C07K16/22;C07K16/00;C07K19/00;A61K39/395;A61P35/00;A61P17/00;A61P13/12
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

1.一種選擇性結合TGFβ1的分離的結合蛋白，其中所述結合蛋白為多肽鏈的二聚體，所述多肽鏈的二聚體的每個單體從N末端至C末端具有下式：

(VH域)-(接頭1)-(VL域)-(接頭2)-(鉸鏈)-(Fc區)，

其中

所述VH域包含由SEQ ID NO:22的氨基酸序列組成的重鏈互補決定區(HCDR)1、由SEQID NO:23的氨基酸序列組成的HCDR2，和由SEQ ID NO:25的氨基酸序列組成的HCDR3；且所述VL域包含由A2S取代的SEQ ID NO:27的氨基酸序列組成的輕鏈互補決定區(LCDR)1、由SEQ ID NO:28的氨基酸序列組成的LCDR2，和由SEQ ID NO:29的氨基酸序列組成的LCDR3，

所述接頭1為[G₄S]₃-型接頭；

所述接頭2為SEQ ID NO:20或其變體，其中所述變體與SEQ ID NO:20長度上的區別在于1至4個氨基酸，或與SEQ ID NO:20的區別在于具有至多2個從甘氨酸到絲氨酸或從絲氨酸到甘氨酸的氨基酸取代；

所述鉸鏈包含來自人IgG1或IgG4鉸鏈區的氨基酸序列，或SEQ ID NO:7或21的氨基酸序列；和

所述Fc區由SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列組成。

2.根據權利要求1的分離的結合蛋白，其中

所述VH域包含SEQ ID NO:1中所示的人VH域序列，或其具有至多4個氨基酸修飾的變體；且

所述VL域包含SEQ ID NO:6中所示的人Vκ域序列，或其具有至多4個氨基酸修飾的變體。

3.根據權利要求1或2所述的分離的結合蛋白，其中所述VH域由SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列組成，且所述VL域由SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列組成。

4.根據權利要求1或2所述的分離的結合蛋白，其中所述接頭1包含氨基酸序列SGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:3)或GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:4)。

5.根據權利要求1所述的分離的結合蛋白，其中所述分離的結合蛋白是具有SEQ IDNO:9中所示的氨基酸序列的所述多肽鏈的二聚體。

6.一種藥物組合物，其包含治療有效量的根據權利要求1至5中任一項所述的分離的結合蛋白和藥學可接受的賦形劑。

7.一種分離的多核苷酸，其編碼根據權利要求1-5中任一項所述的結合蛋白。

8.一種分離的多核苷酸，其編碼根據權利要求5所述的分離的結合蛋白，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:17所示的序列。

9.一種載體，其包含根據權利要求7或8所述的分離的多核苷酸。

10.一種宿主細胞，其包含根據權利要求9所述的載體，其中所述細胞是人胚腎293細胞或中國倉鼠卵巢細胞。

11.一種制備分離的結合蛋白的方法，其包括在產生所述結合蛋白的合適條件下，培養根據權利要求10所述的宿主細胞。

12.根據權利要求1-5中任一項所述的分離的結合蛋白或根據權利要求6所述的藥物組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療選自纖維化疾病、彌散性皮膚系統性硬化病、和骨重塑疾病的疾病。

13.根據權利要求12所述的用途，其中所述纖維化疾病是腎纖維化。