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[發明專利]用于快速活微生物列舉的光譜強度比(SIR)分析有效

專利信息
申請號: 201680009125.8 申請日: 2016-01-09
公開(公告)號: CN107250374B 公開(公告)日: 2021-09-24
發明(設計)人: E·扎哈維 申請(專利權)人: 塔康特精確有限公司
主分類號: C12Q1/04 分類號: C12Q1/04
代理公司: 北京律盟知識產權代理有限責任公司 11287 代理人: 路勇
地址: 以色列*** 國省代碼: 暫無信息
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摘要:
搜索關鍵詞: 用于 快速 微生物 列舉 光譜 強度 sir 分析
【權利要求書】:

1.一種區別經處理樣品中的活細菌與滅活細菌的方法,其包括:

用單一膜締合染料對所述樣品進行染色,其中所述單一膜締合染料對活細菌和滅活細菌染色;

用λ激發下的入射光照射所述樣品,其中,當被所述單一膜締合染料染色時,被照射的經染色的活細菌顯示第一最大發射峰,且其中被照射的經染色的滅活細菌顯示第二最大發射峰,所述第二最大發射峰與所述第一最大發射峰相比移位;

測量每一細菌細胞的(i)波長λ1下來自所述單一膜締合染料的發射光的強度I1;和(ii)波長λ2下來自所述單一膜締合染料的發射光的強度I2;

計算比率I2/I1;以及

基于所述計算的I2/I1比率是大于還是小于預定閾值,確定所述細菌細胞是活的還是滅活的,其中所述方法不以疾病的診斷為目的。

2.根據權利要求1所述的方法,其中所述膜締合染料是N-(3-三乙基銨丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶鎓二溴化物(FM1-43)。

3.根據權利要求1所述的方法,其中所述膜締合染料是N-(3-三乙基銨丙基)-4-(6-(4-(二乙基氨基)苯基)己三烯基)吡啶鎓二溴化物(FM 4-64)。

4.根據權利要求1所述的方法,其中λ激發介于488 nm與570 nm之間。

5.根據權利要求4所述的方法,其中λ激發為488 nm。

6.根據權利要求2所述的方法,λ1為530 nm且λ2為610 nm。

7.根據權利要求3所述的方法,λ1為670 nm且λ2為780 nm。

8.根據權利要求1所述的方法,其進一步包括基于所述計算的I2/I1比率是大于還是小于預定閾值確定所述細菌細胞是活的還是滅活的包括比較I2/I1與閾值A。

9.根據權利要求8所述的方法,其中所述閾值A為2.0,活細菌具有 2.0的I2/I1,且滅活細菌具有 2.0的I2 /I1。

10.根據權利要求1所述的方法,其中基于所述計算的I2/I1比率是大于還是小于預定閾值,確定所述細菌細胞是活的還是滅活的步驟包括:

通過用所述樣品的所述I2/I1除以僅含活細菌的對照的I2/I1比率來計算無活力參數;以及

基于所述計算的無活力參數是大于還是小于閾值B,確定所述細菌細胞是活的還是滅活的。

11.根據權利要求10所述的方法,其中所述閾值B為1.0,活細菌具有≤ 1.0的無活力參數,且滅活細菌具有 1.0的無活力參數。

12.一種區別經處理樣品中的活細菌與滅活細菌的方法,其包括:

用FM1-43染料對所述樣品進行染色;

用488 nm的λ激發下的入射光照射所述樣品,其中被照射的經所述FM1-43染料染色的活細菌顯示第一最大發射峰,且其中被照射的經所述FM1-43染料染色的滅活細菌顯示第二最大發射峰,所述第二最大發射峰與所述第一最大發射峰相比移位;

測量每一細菌細胞的(i)波長λ1 530 nm下的發射光的強度I1和(ii)波長λ2 610 nm下的發射光的強度I2;

計算比率I2/I1;以及

當I2/I1 2.0時確定細菌細胞是活的,且當I2/I1 2.0時確定所述細菌細胞是滅活的,其中所述方法不以疾病的診斷為目的。

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