[發(fā)明專(zhuān)利]儀器驗(yàn)證的方法和系統(tǒng)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680009016.6
• 申請(qǐng)日: 2016-02-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107430066B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: T·韋塞爾;Y·儲(chǔ);J·弗蘭登塔爾;D·吳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 生命技術(shù)公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/27
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/27;G01N21/64
• 代理公司: 北京派特恩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11270
• 代理人: 康艷青;姚開(kāi)麗

1.一種用于驗(yàn)證PCR儀器的方法，該方法包括：

接收來(lái)自一塊驗(yàn)證板的擴(kuò)增數(shù)據(jù)，其中所述驗(yàn)證板包括第一部分和第二部分，所述第一部分包含第一數(shù)量的樣本，所述第二部分包含第二數(shù)量的樣本；

基于所接收的擴(kuò)增數(shù)據(jù)來(lái)生成多條擴(kuò)增曲線(xiàn)，其中每條擴(kuò)增曲線(xiàn)均包括一個(gè)指數(shù)區(qū)域；

通過(guò)由一個(gè)預(yù)定數(shù)值均分從所述多條擴(kuò)增曲線(xiàn)的指數(shù)區(qū)域底部的最低熒光值到所述多條擴(kuò)增曲線(xiàn)的指數(shù)區(qū)域頂部的最高熒光值的熒光值范圍，來(lái)對(duì)于所述多條擴(kuò)增曲線(xiàn)確定一組熒光閾值；

對(duì)于該組熒光閾值的每一個(gè)熒光閾值，確定所述第一數(shù)量樣本生成的擴(kuò)增曲線(xiàn)的第一組循環(huán)閾值(C_t)值(C_tquant1)和所述第二數(shù)量樣本生成的擴(kuò)增曲線(xiàn)的第二組C_t值(C_tquant2)；以及

基于該組熒光閾值的每個(gè)閾值處的C_t值，來(lái)計(jì)算所述第一數(shù)量和第二數(shù)量是否充分可區(qū)分，

其中所述第一數(shù)量和所述第二數(shù)量是否充分可區(qū)分的計(jì)算包括確定所述第一組C_t值和所述第二組C_t值的一個(gè)平均值(μ)和一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(σ)；并且

其中若至少一個(gè)熒光閾值的以下方程的結(jié)果為一正數(shù)，則所述第一數(shù)量和所述第二數(shù)量充分可區(qū)分：

((μC_tquant1-3σC_tquant1)-(μC_tquant2+3σC_tquant2))。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括：

顯示一個(gè)指示，表明如果所述第一數(shù)量和所述第二數(shù)量充分可區(qū)分，則所述儀器已被驗(yàn)證。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一數(shù)量的樣本和所述第二數(shù)量的樣本為RNase P樣本。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一數(shù)量和所述第二數(shù)量不同。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第二數(shù)量與所述第一數(shù)量之間相差2倍。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括：

從所述第一組C_t值和所述第二組C_t值中丟棄預(yù)定數(shù)量的異常值。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中該組熒光閾值包括90個(gè)熒光閾值。

8.一種計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)，該存儲(chǔ)介質(zhì)以處理器可執(zhí)行的PCR儀器驗(yàn)證指令編碼，所述指令包括：

接收來(lái)自一塊驗(yàn)證板的擴(kuò)增數(shù)據(jù)，其中所述驗(yàn)證板包括第一部分和第二部分，所述第一部分包含第一數(shù)量的樣本，所述第二部分包含第二數(shù)量的樣本；

基于所接收的擴(kuò)增數(shù)據(jù)來(lái)生成多條擴(kuò)增曲線(xiàn)，其中每條擴(kuò)增曲線(xiàn)均包括一個(gè)指數(shù)區(qū)域；

通過(guò)由一個(gè)預(yù)定數(shù)值均分從所述多條擴(kuò)增曲線(xiàn)的指數(shù)區(qū)域底部的最低熒光值到所述多條擴(kuò)增曲線(xiàn)的指數(shù)區(qū)域頂部的最高熒光值的熒光值范圍，來(lái)對(duì)于所述多條擴(kuò)增曲線(xiàn)確定一組熒光閾值；

對(duì)于該組熒光閾值的每一個(gè)熒光閾值，確定所述第一數(shù)量樣本生成的擴(kuò)增曲線(xiàn)的第一組循環(huán)閾值(C_t)值(C_tquant1)和所述第二數(shù)量樣本生成的擴(kuò)增曲線(xiàn)的第二組C_t值(C_tquant2)；以及

基于該組熒光閾值的每個(gè)閾值處的C_t值，來(lái)計(jì)算所述第一數(shù)量和所述第二數(shù)量是否充分可區(qū)分，

其中用于計(jì)算所述第一數(shù)量和所述第二數(shù)量是否充分可區(qū)分的指令包括確定所述第一組Ct值和所述第二組Ct值的一個(gè)平均值(μ)和一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(σ)；并且

其中若至少一個(gè)熒光閾值的以下方程的結(jié)果為一正數(shù)，則所述第一數(shù)量和所述第二數(shù)量充分可區(qū)分：

((μC_tquant1-3σC_tquant1)-(μC_tquant2+3σC_tquant2))。