[發(fā)明專利]米根霉菌株及用其制備高活力固體菌劑的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611267396.1
• 申請日: 2016-12-31
• 公開（公告）號: CN106591152B
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周長春;許正宏;陸震鳴;史勁松;房華;周鳳云
• 申請（專利權(quán)）人: 沂源康源生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12J1/04;C12R1/845
• 代理公司: 青島發(fā)思特專利商標(biāo)代理有限公司 37212
• 代理人: 馬俊榮

1.一種米根霉菌株，其特征在于：該菌株為擬青霉(Paecilomyces)屬中的米根霉菌株HP25-3#，該菌株的保藏編號為CGMCC No.12078。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的米根霉菌株，其特征在于：利用通用引物PCR擴(kuò)增該菌的ITSrRNA基因，得到所述的3#菌株的ITS rRNA基因序列614bp，應(yīng)用BLAST程序與數(shù)據(jù)庫中的已有真菌ITS rRNA序列進(jìn)行相似性比較分析，3#菌株的基因序列與米根霉HP25相似性為99％。

3.一種利用權(quán)利要求1所述的米根霉菌株制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)液體種子培養(yǎng)：將米根霉3#接種到液體種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)后獲得種子培養(yǎng)液；

(2)靜置發(fā)酵：將步驟(1)所得的種子培養(yǎng)液接種到固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵培養(yǎng)；

(3)發(fā)孢培養(yǎng)：將步驟(2)所得的固體發(fā)酵產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至淺盤進(jìn)行發(fā)孢培養(yǎng)，繼續(xù)培養(yǎng)40-48h后孢子成熟；

(4)低溫烘干：將步驟(3)所得的發(fā)酵產(chǎn)物移至低溫烘干室進(jìn)行烘干，得到固體菌劑；

(5)磨料制粉：將步驟(4)所得的菌劑進(jìn)行研磨，磨料機(jī)篩孔不低于120目。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于：液體培養(yǎng)基由以下重量百分含量的原料制成：葡萄糖1-10％，麩皮0.5-5％，玉米漿0.1-0.5％。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于：步驟(1)中，米根霉3#與液體種子培養(yǎng)基的裝液量體積之比為1:4～6。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于：步驟(1)中，26-30℃、130-170rpm下培養(yǎng)34-38h。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于：固體發(fā)酵培養(yǎng)基由以下重量百分含量的原料制成：果渣30-50％，麩皮50-70％，碳酸鈣0.01-1％。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于：步驟(2)中，溫度為26-30℃，發(fā)酵時間為24-60h。

9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于：步驟(4)中，32-35℃下烘干24-36h。

10.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備高活力固體菌劑的方法，其特征在于：步驟(4)中，得到的固體菌劑的水分質(zhì)量百分含量為6-8％。