[發明專利]一種丹參丹酚酸A的制備方法

在審

• 申請號: 201611266503.9
• 申請日: 2016-12-31
• 公開（公告）號: CN106938972A
• 公開（公告）日: 2017-07-11
• 發明（設計）人: 李東;關秀偉;徐桂玲;宗梁;張綱;李志剛
• 申請（專利權）人: 京津冀聯創藥物研究（北京）有限公司;神威藥業集團有限公司
• 主分類號: C07C69/732
• 分類號: C07C69/732;C07C67/48;C07C67/32
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1.一種丹酚酸A的制備方法，包括(1)提取步驟、(2)過大孔吸附樹脂柱的粗分離步驟、(3)轉化步驟、(4)精制步驟、(5)萃取步驟、(6)干燥步驟，其特征在于所述的(4)精制步驟是采用中高壓柱色譜對丹酚酸A進行精制純化，中高壓色譜的填料為ODS C18，填料粒徑為10～40um，壓力10～25bar。

2.根據權利要求1的方法，其特征在于所述(4)精制步驟中洗脫溶劑為甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的一種，所述甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的體積比為15:85～25:75，其中所述磷酸水中磷酸的質量百分比為0.1％～0.4％。

3.根據權利要求1的方法，其特征在于所述(4)精制步驟中，填料粒徑為20um。

4.根據權利要求1的方法，其特征在于所述(4)精制步驟中，上樣溶液的丹酚酸A濃度為1.10mg/ml～1.50mg/ml的溶液。

5.根據權利要求1、2、3或4的方法，其特征在于所述(1)提取步驟中，使用的提取溶劑選自水、甲醇、乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。

6.根據權利要求1、2、3或4的方法，其特征在于所述(2)過大孔吸附樹脂柱的粗分離步驟選用的大孔吸附樹脂為LK02或LKY134或D101中的一種，上樣速度為1BV/h，上樣量為18.0～25.0ml/g大孔吸附樹脂，用水和10％乙醇水分別洗脫4～5BV，棄去，然后用70％乙醇洗脫10BV，收集70％乙醇洗脫液。

7.根據權利要求6的方法，其特征在于所述(3)轉化步驟，首先將所述70％乙醇洗脫液濃縮至丹酚酸B和紫草酸總量濃度為10.0～16.0mg/ml的溶液，再加鹽酸或硫酸調PH值為3～6，加熱回流16～20小時。

8.根據權利要求7的方法，其特征在于所述(3)轉化步驟中所述丹酚酸B和紫草酸總量最佳濃度為12.5mg/ml，所述PH值最佳為4.0，最佳加熱回流18個小時。

9.根據權利要求1、2、3、4、6或7的方法，其特征在于所述(5)萃取步驟采用乙酸乙酯作為萃取劑。

10.一種丹酚酸A的制備方法，其特征包括如下步驟：

(1)提取步驟：丹參加8倍量50％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并濾液，濃縮至藥液體積與重量1:1的溶液，靜置過夜，取上清液過濾，或離心，得濃縮液；

(2)過大孔吸附樹脂柱的粗分離步驟：步驟(1)得到的濃縮液過大孔吸附樹脂柱的粗分離，大孔吸附樹脂為LK02或LKY134或D101的一種，上樣速度為1BV/h，上樣量為18.0～25.0ml/g大孔吸附樹脂，靜置4小時，用水和10％乙醇水分別洗脫4～5BV，棄去，然后70％乙醇洗脫10BV，收集70％乙醇洗脫液。

(3)轉化步驟：將步驟(2)收集70％乙醇洗脫液減壓回收乙醇，減壓濃縮至丹酚酸B和紫草酸總量濃度為12.5mg/ml的溶液，加鹽酸或硫酸調PH值為4.0，加熱回流18小時，即得富含丹酚酸A的溶液；

(4)精制步驟：將步驟(3)所得的富含丹酚酸A的溶液，加水稀釋至丹酚酸A濃度為1.10mg/ml～1.50mg/ml的溶液，過濾，上中高壓色譜柱，填料為ODS C18，填料粒徑為10～40um，壓力10～25bar，洗脫溶劑為甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的一種，所述甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的體積比為15:85～25:75，其中所述磷酸水中磷酸的質量百分比為0.1％～0.4％，截取符合要求的丹酚酸A溶液部分；

(5)萃取步驟：將步驟(4)截取的符合要求的丹酚酸A溶液，減壓濃縮至無醇，用乙酸乙酯萃取；

(6)干燥步驟：減壓回收乙酸乙酯，冷凍干燥。