[發明專利]裂殖壺菌WZYU011及其生產凝乳酶的方法

有效

• 申請號: 201611266502.4
• 申請日: 2016-12-31
• 公開（公告）號: CN107245451B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 于欣君;汪釗;陳虹;葛佳煒
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/58;C12R1/645
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.裂殖壺菌（Aurantiochytrium sp.）WZYU011，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC NO:M 2016619，保藏日期為：2016年11月7日，保藏地址為中國武漢，武漢大學，郵編430072。

2.一種利用權利要求1所述裂殖壺菌WZYU011生產凝乳酶的方法，其特征在于所述方法為：將裂殖壺菌WZYU011接種至發酵培養基中，在25-35℃下，50-600rpm振蕩培養，得到發酵液，將發酵液離心，棄細胞沉淀，得到含凝乳酶的粗酶液，將粗酶液分離純化，獲得凝乳酶；所述發酵培養基組成為：葡萄糖40-120g/L，酵母粉10-20g/L，蛋白胨5-20g/L，海鹽20g/L，溶劑為水。

3.如權利要求2所述利用裂殖壺菌WZYU011生產凝乳酶的方法，其特征在于所述裂殖壺菌WZYU011接種前先進行斜面活化和種子擴大培養：（1）斜面培養：將裂殖壺菌WZYU011接種于斜面培養基上，25-35℃下培養1-3天；所述斜面培養基組成為：葡萄糖20g/L，酵母粉10g/L，蛋白陳5g/L，海鹽20g/L，瓊脂20g/L，溶劑為水，pH值為6；（2）種子培養：將斜面培養基上的菌體接入含種子培養基的三角瓶中，在25-35℃下，50-300rpm震蕩培養1-3天，得到種子液；所述種子培養基組為：葡萄糖60g/L，酵母粉10g/L，蛋白陳5g/L，海鹽20g/L，溶劑為水，pH值為6。

4.如權利要求3所述利用裂殖壺菌WZYU011生產凝乳酶的方法，其特征在于：將種子液接入含發酵培養基的發酵罐中，在25-35℃下，轉速50-600rpm，通氣量40-100L/min，溶氧量20-60%的條件下，培養時間1-6天，獲得發酵液。

5.如權利要求4所述利用裂殖壺菌WZYU011生產凝乳酶的方法，其特征在于所述種子液以體積濃度1%-10%的接種量接種至發酵培養基。

6.如權利要求4所述利用裂殖壺菌WZYU011生產凝乳酶的方法，其特征在于所述發酵液在5000rpm，4℃下離心5min，獲得粗酶液。

7.如權利要求4所述利用裂殖壺菌WZYU011生產凝乳酶的方法，其特征在于所述發酵培養基組成為：葡萄糖60g/L，酵母粉20g/L，蛋白胨10g/L，海鹽20g/L，溶劑為水。