[發明專利]食品中L-胱氨酸的檢測方法

有效

• 申請號: 201611256198.5
• 申請日: 2016-12-30
• 公開（公告）號: CN106770779B
• 公開（公告）日: 2019-11-15
• 發明（設計）人: 焦紅;胡燁敏;曾燕媚;陳秀云;林志鵬
• 申請（專利權）人: 廣州市宜健醫學技術發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 44202 廣州三環專利商標代理有限公司
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫<國際申請>=<國際公布>

本發明公開了一種檢測方法，具體涉及一種食品中L?胱氨酸的檢測方法。本發明食品中L?胱氨酸的檢測方法包括以下步驟：(1)將食品樣品進行前處理，得到上樣液；(2)采用HPLC?MS/MS進行分析：采用HPLC?MS/MS分別測定L?胱氨酸標準溶液和步驟(1)得到的上樣液，將上樣液的測定結果與L?胱氨酸標準溶液的測定結果進行比較，對食品樣品中的L?胱氨酸進行定性或定量。本發明檢測食品中L?胱氨酸時，由于分離過程中采用了特定的固定相和流動相，本發明對L?胱氨酸的分離度較高，分離效果較好。同時，本發明采用三重四級桿串聯質譜作為檢測器，本發明檢測L?胱氨酸的靈敏度較高、檢出限較低、線性范圍較寬且準確度高。

技術領域

本發明涉及一種檢測方法，具體涉及一種食品中L-胱氨酸的檢測方法。

背景技術

L-胱氨酸，由兩個半胱氨酸通過其側鏈巰基氧化成二硫鍵后形成的產物，其分子式為C₆H₁₂N₂O₄S₂，外觀為白色六角形板狀結晶或白色結晶粉末。L-胱氨酸溶解于稀鹽酸或氫氧化鈉溶液中，它極難溶于水，不溶于乙醇。L-胱氨酸是人體必需的氨基酸之一，其用途廣泛：在醫藥上L-胱氨酸為氨基酸類藥物，能促進細胞氧化還原功能，使肝臟功能旺盛，并能中和毒素、促進白細胞增生、阻止病原菌發育，主要用于各種脫發癥，也用于痢疾、傷寒、流感等急性傳染病、還用于氣喘、神經痛、濕疹以及各種中毒疾患等，并且L-胱氨酸有維持蛋白質構型的作用；L-胱氨酸還是一種營養增補劑，用于奶粉的母乳化；其也可作化妝品的添加劑。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足之處而提供一種檢出限和定量限均較低的食品中L-胱氨酸的檢測方法。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案為：一種食品中L-胱氨酸的檢測方法，其包括以下步驟：

(1)將食品樣品進行前處理，得到上樣液；

(2)采用HPLC-MS/MS進行分析：采用HPLC-MS/MS分別測定L-胱氨酸標準溶液和步驟(1)得到的上樣液，將上樣液的測定結果與L-胱氨酸標準溶液的測定結果進行比較，對食品樣品中的L-胱氨酸進行定性或定量；

HPLC-MS/MS進行分析時，HPLC的條件為：色譜柱為C18柱；流動相由水相和有機相組成，所述水相由甲酸和水組成，所述甲酸與水的體積比為0.15～0.35％；所述有機相由甲酸和乙腈組成，所述有機相中，甲酸與乙腈的體積比為0.15～0.35％；在流速為0.4～0.6mL/min的條件下進行梯度洗脫；

HPLC-MS/MS進行分析時，質譜檢測的條件為：采用電噴霧離子源，檢測器為三重四級桿串聯質譜檢測器。

本發明檢測食品中L-胱氨酸時，由于分離過程中采用了特定的固定相和流動相，本發明L-胱氨酸的分離度較高，分離效果較好。同時，本發明采用三重四級桿串聯質譜作為檢測器，本發明檢測L-胱氨酸的靈敏度較高、檢出限較低，具體地：本發明對食品中L-胱氨酸測定的檢出限為10ng/mL，定量限為20ng/mL。并且，研究表明，本發明的線性范圍較寬(標準曲線的線性范圍為：20.0～1500.0ng/mL)，加標回收率較好。

作為本發明所述食品中L-胱氨酸的檢測方法的優選實施方式，所述水相中，甲酸與水的體積比為0.25％；所述有機相中，甲酸與乙腈體積比為0.25％。