[發(fā)明專利]一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基瓶栽出菇培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611255267.0
• 申請日: 2016-12-30
• 公開（公告）號: CN106613359B
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郝繼偉
• 申請（專利權(quán)）人: 臨沂大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 37218 濟(jì)南泉城專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 徐明雙

1.一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基瓶栽出菇培養(yǎng)方法，其特征在于，是由以下步驟制備得到的：

1）培養(yǎng)基配制：將液體培養(yǎng)基分裝至培養(yǎng)瓶中，透氣封口膜封口，120℃條件下滅菌20-30min；液體培養(yǎng)基的裝液量為培養(yǎng)瓶體積的30-50%；所述液體培養(yǎng)基的配方為：馬鈴薯為100g/L，可溶性淀粉為10g/L，蛋白胨20g/L，KH₂PO₄為1.5g/L，MgSO₄·7H₂O為1.0g/L，具體的制備方法為：稱100g去皮馬鈴薯，切成長寬高均約為1cm的小塊，加1000mL水中，煮沸20-30min，用4層紗布過濾取濾液，加入10g可溶性淀粉、20g蛋白胨、1.5gKH₂PO₄和1.0g MgSO₄·7H₂O定容至1000mL；

2）接種：滅菌完畢，待培養(yǎng)基溫度冷卻至25℃左右，在無菌環(huán)境下，接入一塊豆粒大小蛹蟲草斜面母種；

3）液體菌球培養(yǎng)：將接種后的培養(yǎng)瓶置于震蕩培養(yǎng)箱中，于轉(zhuǎn)速120r/min、溫度20℃條件下避光培養(yǎng)6-7d，液體培養(yǎng)基內(nèi)生成大量的菌球；

4）氣生菌絲培養(yǎng)：將生成大量菌球的培養(yǎng)瓶置于震蕩培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，于溫度20-22℃黑暗條件下靜止培養(yǎng)10-15d，培養(yǎng)基表面生成氣生菌絲；

5）轉(zhuǎn)色：將生成氣生菌絲每天照射13-15h，光照強(qiáng)度為200-250Lx、濕度為55-60%和溫度為20-22℃條件下，培養(yǎng)4-5d，至白色氣生菌絲轉(zhuǎn)化為橘黃色；

6）促原基分化：在無菌環(huán)境下進(jìn)行搔菌處理，白天控制溫度為20-21℃，夜晚控制溫度為10-15℃，給以溫差刺激，在光照強(qiáng)度100-200Lx條件下每天光照13-14h，5-10d后即有大量原基形成；

7）出菇管理：在透氣封口膜上刺6-8個直徑為1cm的小孔，光照強(qiáng)度為200-250Lx、溫度為20-22℃和濕度為75-85%條件下，全天給光，培養(yǎng)5d，即有子座幼體形成；待子座幼體長到1cm以上，溫度控制在18-20℃，濕度控制在80-90%，并逐步加強(qiáng)通風(fēng)，可促使子座緩慢成長，即可。