[發明專利]一種快速穩定的Tn5轉座酶酶活測定方法在審
| 申請號： | 201611250704.X | 申請日： | 2016-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN108265101A | 公開（公告）日： | 2018-07-10 |
| 發明（設計）人： | 王磊;王亮;鄭春陽 | 申請（專利權）人： | 天津強微特生物科技有限公司;華北理工大學 |
| 主分類號： | C12Q1/48 | 分類號： | C12Q1/48 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 300384 天津市南開*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 底物 轉座酶 快速穩定 酶活測定 反應緩沖液 酶活檢測 數值比較 變性劑 鹽酸胍 變性 去除 轉座 過濾 濃縮 釋放 檢測 生產 | ||
【權利要求書】：
1.一種Tn5轉座酶的酶活測定方法，其特征在于包含以下步驟：
（1）測活底物同轉座酶和反應緩沖液混合（2）進行轉座反應（3）加入變性劑（如SDS、鹽酸胍等）使轉座酶變性，分離轉座酶和DNA片段（4）加入夠識別底物標記的介質，結合未反應的底物（5）通過選擇性手段（如離心、過濾、濃縮等）去除結合了底物的介質（6）檢測釋放出的帶標記的DNA的含量，同標準數值比較，得到Tn5轉座酶的活性。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物為線性DNA，兩端分別包含固定用標記和檢測性標記，固定用標記優選生物素，檢測性標記優選熒光素，所述底物的序列中包含有不限數量的、可以被Tn5轉座酶識別的末端序列，末端序列優選ME序列，數量優選2個。
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