[發(fā)明專(zhuān)利]一種肛瘺補(bǔ)片或栓、制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611248803.4
• 申請(qǐng)日: 2016-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106730008B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫繼煌;石清東;吳文華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京桀亞萊福生物技術(shù)有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61L27/36
• 分類(lèi)號(hào): A61L27/36;A61L27/50
• 代理公司: 11002 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 王文君

1.一種脫細(xì)胞異體真皮基質(zhì)的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一，將異體皮原料投入盛有蛋白酶溶液的容器中，浸泡振蕩處理，得半成品A；

步驟二，將半成品A投入盛有含有表面活性劑和高滲鹽溶液的容器中，超聲浸泡處理；更換表面活性劑和高滲鹽溶液，超聲浸泡處理；重復(fù)該操作多次，得半成品B；

步驟三，將半成品B用生理鹽水浸泡，振蕩處理，得半成品C；

步驟四，將半成品C投入盛有交聯(lián)劑溶液的容器中，浸泡, 得半成品D；

步驟五，將半成品D取出投入盛有生理鹽水溶液容器中浸泡，得半成品E；

步驟六，將半成品E投入盛有DNA水解酶溶液的容器中，浸泡處理，得半成品F；

步驟七，將半成品F用生理鹽水浸泡振蕩處理，得半成品G；

步驟八，將半成品G取出，用氨基酸溶液浸泡后，投入盛有生理鹽水溶液容器中，靜置，得半成品H；

步驟九，將半成品H取出，包裝，滅菌，得成品I；

其中，所述脫細(xì)胞異體真皮基質(zhì)取材于人體皮膚組織；

所述蛋白酶溶液為0.2 w/v %胰蛋白酶-dispase酶溶液，其中，胰蛋白酶與dispase酶的質(zhì)量比是2:1，溶液pH值為7.0-8.0；或所述蛋白酶溶液為0.3 w/v %胰蛋白酶-木瓜蛋白酶溶液，其中，胰蛋白酶與木瓜蛋白酶的質(zhì)量比為2.5:1，溶液pH值為6.0-8.0；或所述蛋白酶溶液為0.2w/v%胰蛋白酶-菠蘿蛋白酶溶液，其中，胰蛋白酶與菠蘿蛋白酶的質(zhì)量比為1:1，溶液pH值為7.0-8.0；

其中表面活性劑和高滲鹽溶液的配方是含有0.2g/L聚乙二醇與SDS，或含有0.2g/L聚乙二醇與Triton X-100的高滲鹽溶液，其中，聚乙二醇選擇分子量1000-2000，聚乙二醇與SDS或Triton X-100的質(zhì)量比為1:1~3:2，高滲鹽為50mM tris-HCl，1M氯化鈉和10mM EDTA；

其中，交聯(lián)劑溶液的配方是用京尼平與選自戊二醛、1-（3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺、N-羥基丁二酰亞胺、一水嗎啉乙磺酸任一作為交聯(lián)劑，其中京尼平與另一交聯(lián)劑的質(zhì)量比為3-6:1；交聯(lián)劑與異體皮原料質(zhì)量比為0.6-0.9:1；

其中DNA水解酶溶液的配方是DNA水解酶濃度為5-6g/L，pH7.0-8.0；

其中氨基酸溶液由甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸和谷氨酸配制而成，氨基酸濃度為1.5-2g/L；其中，由甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸、谷氨酸按照3-4:1.1-1.3:1.0-1.6:0.96-1.16:0.07-0.08質(zhì)量比配制；

其中步驟一中的浸泡振蕩為浸泡3-6小時(shí)，振蕩轉(zhuǎn)速為50-200rpm，重復(fù)操作1-3次；

步驟二中的超聲浸泡條件為：30-60KHz，100-400W，超聲5-10分鐘，浸泡2-4小時(shí)，重復(fù)2-4次；

步驟三中的振蕩處理?xiàng)l件為振蕩2小時(shí)，更換生理鹽水，繼續(xù)振蕩處理，重復(fù)該操作4-6次；

其中步驟四中的浸泡時(shí)間為3-6h；

步驟五中的浸泡時(shí)間為8小時(shí)，浸泡次數(shù)為6-9次，浸泡溫度為5-10℃；

其中步驟七的條件為生理鹽水浸泡10-12小時(shí)，振蕩處理；更換生理鹽水，振蕩處理，重復(fù)該操作2-4次。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述脫細(xì)胞異體真皮基質(zhì)的縫合強(qiáng)度為16N-20N、拉伸強(qiáng)度為3.0MPa -7.0MPa、拉伸伸長(zhǎng)率為10%-28.9%。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟一、三、七中振蕩轉(zhuǎn)速為50-200rpm。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述氨基酸溶液中氨基酸濃度為1.5g/L，由甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸、谷氨酸按照3.3:1.1:1.3:0.96:0.07質(zhì)量比配制。

5.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，其中步驟九的包裝為將半成品H裝入包裝袋中，封口包裝完畢；所述滅菌為鈷-60照射，照射劑量為20-30kGy。

6.一種肛瘺補(bǔ)片的制備方法，其特征在于，將權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述方法獲得的脫細(xì)胞異體真皮基質(zhì)按照實(shí)際需要制備成肛瘺補(bǔ)片。