[發明專利]一種符合無菌操作要求的新型細胞凍存袋及使用方法

有效

• 申請號: 201611244268.5
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN106577636B
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 徐峰波;生德偉;崔光晶;曹光鑫
• 申請（專利權）人: 銀豐生物工程集團有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 山東舜天律師事務所37226
• 代理人: 李曉平

技術領域

本發明屬于新型醫療器械領域，確切地說是一種符合無菌操作要求的新型細胞凍存袋及使用方法，即一種醫用生物樣品深低溫凍存保護袋（簡稱凍存袋）。

背景技術

干細胞，是一類具有自我更新和分化潛能的細胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能。臍帶血造血干細胞來源于胎兒娩出后殘留在胎盤和臍帶中的血液，臨床上可用于重建人體造血和免疫系統，治療多種疾病。截至目前，衛生部批準設置北京、天津、上海、廣東、四川、山東、浙江七家臍帶血庫，存儲臍帶血已逾80萬份。為了進一步提高臍帶血造血干細胞保存的質量，與國際臍帶血庫管理規范接軌，國內多家臍血庫已開始申請美國血庫協會AABB等國際干細胞庫管理資質認證。這標志著國內臍帶血庫的管理已十分重視與國際接軌，但在接受國際標準審查時，發現國內臍帶血庫在制備和凍存中存在者若干質量隱患，包括干細胞灌裝和抗凝劑加注中的開放操作等問題，亟待得到解決。

一般臍帶血造血干細胞庫采用-196℃液氮容器長期儲存臨床可用的造血干細胞，因此高質量地制備和深低溫保存干細胞成了臍帶血造血干細胞的儲存和應用的重要前提。臍帶血干細胞制備完成后，需從制備袋轉移至深低溫專用的凍存袋中，此期間的操作存在開放操作，是造成臍帶血干細胞污染病原微生物的重要環節。而且，隨著臍帶血干細胞儲存的廣泛普及以及采集制備水平的提高，大體積的臍帶血干細胞也越來越多。對于大體積臍帶血樣本，只能進行多袋保存，目前干細胞保存普遍使用的單聯凍存袋已逐漸不能滿足實際需要。因此，如何發明一種新型符合無菌操作要求細胞凍存袋成了亟待解決的問題。

常規使用的凍存袋存在問題如下；

（1）臍帶血干細胞制備后，需轉移至凍存袋冰凍保存。目前這一過程一般先采用醫用無菌注射器抽取干細胞，再注入到單獨的凍存袋中。該操作環節較多，且存在明顯的開放性操作增加了污染的風險。

（2）臍帶血造血干細胞長期凍存必須要添加凍存保護劑保護細胞。目前加入保護劑的常用方法為：先用注射器抽取適量的凍存保護劑，再通過凍存袋支管將保護劑注入到細胞中。該過程也存在開放操作，而且未對加入的凍存保護劑做無菌控制，使通過凍存保護劑引入污染源的風險增大。

（3）目前使用較為普遍的進口凍存袋一般附帶“資料袋”、多個并列支管等實際操作中不采用的部件，而且需要經過裁剪、熱合等多余操作，不利于提高工作效率，甚至會帶來裁剪時損壞凍存袋的隱患。

（4）目前使用較為普遍的凍存袋的連接管用于保存檢測樣本的長度不夠，凍存袋到連接導管分支處的長度太短，在實際操作中不能滿足用于熱合密封留存足量的檢測樣本的要求。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：（1）臍帶血干細胞制備后，需轉移至凍存袋冰凍保存。目前這一過程一般先采用醫用無菌注射器抽取干細胞，再注入到單獨的凍存袋中。該操作環節較多，且存在明顯的開放性操作增加了污染的風險。（2）臍帶血造血干細胞長期凍存必須要添加凍存保護劑保護細胞。目前加入保護劑的常用方法為：先用注射器抽取適量的凍存保護劑，再通過凍存袋支管將保護劑注入到細胞中。該過程也存在開放操作，而且未對加入的凍存保護劑做無菌控制，使通過凍存保護劑引入污染源的風險增大。（3）目前使用較為普遍的進口凍存袋一般附帶“資料袋”、多個并列支管等實際操作中不采用的部件，而且需要經過裁剪、熱合等多余操作，不利于提高工作效率，甚至會帶來裁剪時損壞凍存袋的隱患。（4）目前使用較為普遍的凍存袋的連接管用于保存檢測樣本的長度不夠，凍存袋到連接導管分支處的長度太短，在實際操作中不能滿足用于熱合密封留存足量的檢測樣本的要求。

為解決上述技術問題，本發明采用如下技術手段：

一種符合無菌操作要求的新型細胞凍存袋，包括凍存袋、進樣管，所述的進樣管一端連接凍存袋，進樣管的另一端設有支管，支管設有進樣管管口；所述的進樣管管口包括第一進樣管管口和第二進樣管管口，第一進樣管管口為凍存保護劑加注口，第二進樣管管口為雙頭，其中一頭為穿刺針，另一頭為取樣管管口，進樣管管口設有密封結構，進樣管設有濾菌防污結構，所述的凍存袋包括大凍存袋和小凍存袋，大凍存袋和小凍存袋上方均設有穿刺口。

作為優選，本發明更進一步的技術方案是：

所述的凍存袋包括獨立的單聯袋，凍存袋上方設有穿刺口，單聯袋液體容量在30-50mL。

所述的凍存袋中大凍存袋液體容量在30-50mL，小凍存袋液體容量在10-25mL，小凍存袋通過導管與大凍存袋連通，大凍存袋和小凍存袋之間導管長5-10cm。