[發(fā)明專利]一種檢測復(fù)雜基質(zhì)中精喹禾靈及其代謝物殘留的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611244039.3
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN106645493B
• 公開（公告）日: 2019-10-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王秀國;李義強;徐茜;林勇;翟明泉;趙海剛;陳丹;尤祥偉;陳志厚;林偉;徐辰生;劉通
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所;福建省煙草公司南平市公司;山東淄博煙草有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 佛山粵進知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44463
• 代理人: 張敏

本發(fā)明提供了一種檢測復(fù)雜基質(zhì)中精喹禾靈及其代謝物殘留的方法，該方法為基質(zhì)固相分散萃取方法，包括以下步驟：(1)提取樣品中殘留；(2)凈化：量取步驟(2)中提取液加入凈化劑進行基質(zhì)固相分散萃取；(3)配置標準溶液；(4)高效液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC?MS/MS)檢測；(5)建立標準曲線；(6)結(jié)果分析。本發(fā)明的檢測方法能夠快速、靈敏、準確的測定精喹禾靈及其代謝物殘留量，為除草劑精喹禾靈及其代謝物的檢測提供了一種新的檢測技術(shù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于痕量分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種能夠檢測復(fù)雜基質(zhì)中精喹禾靈及其代謝物殘留的方法。

背景技術(shù)

精喹禾靈是由日本日產(chǎn)化學(xué)工業(yè)株式會社開發(fā)的苯氧羧酸酯類內(nèi)吸傳導(dǎo)型莖葉處理除草劑。其作用機理主要是：抑制細胞脂肪酸合成，抑制乙酰CoA羧化酶，破壞分生組織生長，使雜草死亡。研究發(fā)現(xiàn)，精喹禾靈對人體具有致突變作用，已被歐盟等國家列為逐漸淘汰名錄。但在我國，精喹禾靈仍然作為一種廣泛生產(chǎn)和使用的優(yōu)良除草劑，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛和大量使用。除此之外，國家對精喹禾靈在各種作物中的限量制定較少，缺乏有效監(jiān)督，導(dǎo)致使用存在較大的盲目性，生產(chǎn)事故時有發(fā)生。因此，建立精喹禾靈在作物中殘留量的分析與檢測方法，規(guī)范用藥，保障農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和人民健康具有重要意義。

精喹禾靈主要代謝為精喹禾靈酸。研究表明，精喹禾靈酸毒性遠高于其母體。在分析精喹禾靈的同時，需要特別關(guān)注其代謝物的產(chǎn)生和含量變化。作為除草劑，精喹禾靈含量較低，尤其作為其代謝物，含量極難檢測。復(fù)雜的基質(zhì)背景會對被低含量的分析目標化合物的提取、凈化和測定等帶來很大困難，因此樣品前處理不僅復(fù)雜困難，而且對于分析結(jié)果的準確可靠和靈敏度具有決定性作用。

經(jīng)對現(xiàn)有技術(shù)的文獻檢索發(fā)現(xiàn)，目前關(guān)于精喹禾靈殘留量的測定方法，雖然能夠保證精喹禾靈在簡單基質(zhì)中的提取效率，但存在以下不足：1)采用液液分配或固相萃取的凈化方法不僅操作復(fù)雜，浪費試劑，而且對含大量色素、油脂、雜質(zhì)的復(fù)雜樣品凈化效果重現(xiàn)性差，雜質(zhì)峰極易干擾檢測結(jié)果。2)精喹禾靈和精喹禾靈酸極性差異較大，難以通過一種液液分配或固相萃取的凈化方法去除雜質(zhì)，需要采用兩種及以上方法凈化，操作復(fù)雜，中間極易造成殘留量損失。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種操作較簡單、對目標物干擾少，準確檢測復(fù)雜基質(zhì)中精喹禾靈及其代謝物殘留的方法。該方法具有簡便迅速、準確可靠的特點，對指導(dǎo)精喹禾靈的安全合理使用，控制食品和作物中精喹禾靈殘留具有重要價值。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種檢測復(fù)雜基質(zhì)中精喹禾靈及其代謝物殘留的方法，該凈化方法為基質(zhì)固相分散萃取方法，具體包括以下步驟：

(1)提取：稱取樣品于離心管中，加入乙腈，渦旋振蕩，加入鹽包、渦旋振蕩、離心，取上清液；

(2)凈化：量取步驟(2)中提取液于離心管中，然后加入凈化劑進行基質(zhì)固相分散萃取，渦旋、離心，取上清液；

(3)標準溶液的配制：稱取精喹禾靈及其代謝物標準品，用有機溶劑溶解定容，制成標準儲備液，將標準儲備液逐級稀釋，配制成系列濃度標準工作液；

(4)儀器檢測：用步驟(1)中的系列濃度標準工作液進樣，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MSMS)檢測，在此基礎(chǔ)上，對步驟(3)收集的凈化樣品進行HPLC-MS/MS檢測；

(5)標準曲線的建立：采用峰面積定量，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線；

(6)結(jié)果分析：按以下公式計算試樣中農(nóng)藥的含量

R—樣品中所含農(nóng)藥殘留量，單位mg/kg；

C_標—標準溶液濃度，單位mg/L；

V_標—標準溶液進樣體積，單位μL；