[發(fā)明專利]污水中殘留藥物降解菌的篩選方法及所用培養(yǎng)基

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611242577.9
• 申請(qǐng)日: 2016-12-29
• 公開（公告）號(hào): CN108611290A
• 公開（公告）日: 2018-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林忠華;栗艷霞;林群聲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 香港城市大學(xué)深圳研究院
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/025;C12R1/05;C12R1/38;C12R1/01
• 代理公司: 北京三友知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾;姚亮

本發(fā)明提供了污水中殘留藥物降解菌的篩選方法及所用培養(yǎng)基。本發(fā)明的篩選污水中可降解殘留藥物的菌株的方法包括：將污水樣本在液體BM培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，經(jīng)過梯度稀釋后再在固體BM培養(yǎng)基上涂布平板培養(yǎng)，初步篩選得到污水中的菌株；其中，所述BM培養(yǎng)基包括：每1000mL液體培養(yǎng)基中含有0.4?0.6g NaCl、1?2g NH₄Cl、1?2g K₂HPO₄、0.25?0.75g KH₂PO₄和0.1?0.3g MgSO₄，加入超純水至1000mL；每1000mL固體培養(yǎng)基中可在液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)上含有14?16g瓊脂。本發(fā)明的技術(shù)能有效地篩選到對(duì)藥物降解效率高的工程菌株。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于污水中可降解藥物的菌株篩選技術(shù)，具體而言，本發(fā)明是關(guān)于一種篩選污水中可降解殘留藥物的菌株的方法、該方法中所用到的培養(yǎng)基組合物、該方法所篩選到的污水中殘留藥物降解菌、以及利用所述降解菌對(duì)污水中殘留藥物進(jìn)行降解的方法。

背景技術(shù)

據(jù)研究報(bào)道，目前城市污水處理廠經(jīng)過處理的污水仍然殘留有多種藥物，常見的殘留藥物如頭孢氨芐(Cefalexin)、氯霉素(Chloramphenicol)、萘普生(Naproxen)、新諾明(Sulfamethoxazole)、咖啡因(Caffeine)、水楊酸(Salicylic acid)等，這類污水直接排放到環(huán)境中，會(huì)對(duì)自然環(huán)境造成很大污染，對(duì)人類造成潛在危害。

為能去除污水中的殘留藥物，篩選一些能降解污水中殘留藥物的微生物是當(dāng)前生化處理污水的一個(gè)研究方向。

現(xiàn)有的可降解殘留藥物的微生物菌種的篩選方法，多為L(zhǎng)B培養(yǎng)基方法。然而，實(shí)際實(shí)驗(yàn)表明，采用LB培養(yǎng)基篩選方法，難以有效地全面篩選到對(duì)藥物降解效率高的工程菌株，所篩選到的菌株種類有限，基本都是已知的種屬，不具有檢測(cè)殘留藥物降解性的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明主要是提供一種篩選污水中可降解殘留藥物的菌株的方法，還提供了該方法中所用到的培養(yǎng)基組合物，以有效地篩選到對(duì)藥物降解效率高的工程菌株，用于降解污水中殘留藥物。

一方面，本發(fā)明提供了一種篩選污水中可降解殘留藥物的菌株的方法，該方法主要是利用培養(yǎng)基BM(Basic Medium)分離污水中的菌株，具體如下：把采集的污水樣本分別在液體培養(yǎng)基BM中擴(kuò)大培養(yǎng)，經(jīng)過梯度稀釋(例如按照1X、3X、5X、10X的稀釋比例)后再在固體培養(yǎng)基BM上涂布平板培養(yǎng)，初步篩選得到污水中的菌株。進(jìn)一步，本發(fā)明在培養(yǎng)基FM中加入兩種不同濃度的污水常見殘留藥物的混合物，培養(yǎng)后，利用Agilent HP1100液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)兩種培養(yǎng)基中各自的藥物含量，計(jì)算得到各個(gè)菌株對(duì)各種藥物的降解效率，從而進(jìn)一步篩選藥物降解菌。

具體地，本發(fā)明提供的篩選污水中可降解殘留藥物的菌株的方法包括：

將污水樣本在液體BM培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，經(jīng)過梯度稀釋后再在固體BM培養(yǎng)基上涂布平板培養(yǎng)，初步篩選得到污水中的菌株；

其中，所述BM培養(yǎng)基包括：

每1000mL液體培養(yǎng)基中含有0.4-0.6g NaCl、1-2g NH₄Cl、1-2g K₂HPO₄、0.25-0.75g KH₂PO₄和0.1-0.3g MgSO₄，加入超純水至1000mL；

每1000mL固體培養(yǎng)基中含有0.4-0.6g NaCl、1-2g NH₄Cl、1-2g K₂HPO₄、0.25-0.75g KH₂PO₄、0.1-0.3g MgSO₄和14-16g瓊脂，加入超純水至1000mL。