[發明專利]一種計算化學藥物中有關物質含量的HPLC-ELSD雙校正因子法

有效

• 申請號: 201611241484.4
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN106706792B
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 張慧;李于采薇;周潔;周靜;趙卿;霍立茹;李戰
• 申請（專利權）人: 南京濟群醫藥科技股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及藥物分析技術領域，公開了一種計算化學藥物中有關物質含量的HPLC?ELSD雙校正因子法。本發明特別針對大多數無紫外吸收的熱穩定化學藥物，采用HPLC?ELSD，即高效液相色譜和通用型檢測器蒸發光散射檢測器相結合的技術，可達到快速有效的檢測，不受流動相梯度的影響。根據標準曲線方程，用本發明的雙校正因子主成分自身對照法，即同時對斜率k和截距b進行校正，不僅能精確的計算出化學藥物中有關物質的百分含量，還可以減少雜質對照品的使用量，操作簡單，經濟實用，準確可靠，可通用于所有化學藥物中有關物質含量的計算。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，特別涉及一種計算化學藥物中有關物質含量的HPLC-ELSD雙校正因子法。

背景技術

相對校正因子F：由于同一檢測器對不同物質的響應值不同，所以當相同質量的不同物質通過檢測器時，產生的峰面積不一定相等。為使峰面積能夠準確地反映待測組分的含量，就必須先用已知量的待測組分測定在所用色譜條件下的峰面積，以計算定量校正因子F＝(A雜/C雜)/(A樣/C樣)，對于常規線性方程可推導F＝雜質斜率/樣品斜率。

蒸發光散射檢測器(Evaporative Light Scattering Detector，簡稱ELSD)，又稱蒸發型質量檢測器，是一種通用型質量檢測器。不僅可彌補常規紫外檢測(UVD)不能檢測無紫外吸收或只有紫外末端吸收物質的缺陷,而且與同樣可用于無紫外吸收物質檢測的示差折光檢測(RID)相比,靈敏度略高、受溫度等實驗條件影響小和可用于梯度洗脫等優點，對比較新型的電霧式檢測器(CAD)具有性價比高，更低的使用成本和普遍通用的優點。

雖然ELSD在相同的色譜條件下，物理性質相似的物質在ELSD中形成的顆粒大小、形狀接近，因而可以給出相對一致的響應。然而在實際運用的過程中發現，不同物質的響應略有差別，特別是梯度變化前后的物質響應差較大。由于ELSD的標準方曲線方程是對數型線性LgC＝kLgA+b，待測物濃度計算為指數型C＝10^((LgA-b)/k)。所以樣品及其有關物質的標準曲線方程k、b值只要略有差異，測得量就會有指數級別的差異。如粗略用相對校正因子＝1的主成分自身對照法或只對斜率k進行精確校正后代入計算，其測定結果極不準確。因而ELSD多采用對照品外標法，但對于有關物質較多的樣品來說操作復雜且成本昂貴。目前，對于用HPLC-ELSD檢測有關物質含量的報道一般采用雜質對照品外標法或將校正因子近似為1代入計算，前者雜質對照品消耗量大，后者的結果經驗證回收率范圍遠超2015版藥典規定，現并沒有一種方法能精確的計算化學藥物與其有關物質校正因子，對于運用HPLC-ELSD精準的檢測有關物質的含量存在瓶頸。

發明內容

為了解決上述問題，本發明推算出一種計算化學藥物中有關物質含量的HPLC-ELSD雙校正因子法，此方法可用于所有ELSD檢測器測定化學藥物有關物質的含量，測量精確，操作方便，簡單易實施，無需消耗昂貴且不易獲得的雜質對照品。

本發明的目的通過以下技術方案實現，包括以下：

一種HPLC-ELSD雙校正因子計算方法：

a)通過標準曲線方程LgA＝kLgC+b，得到k_{供試品對照}、k_雜質對照、b_{供試品對照}、b_雜質對照

斜率k＝SLOPE(LgA,LgC)

截距b＝INTERCEPT(LgA,LgC)，

其中A表示供試品對照品、雜質對照品峰面積；

C表示供試品對照品、雜質對照品濃度(mg/ml)；

k_{供試品對照}表示供試品對照品標準曲線方程的斜率；

k_雜質對照表示雜質品對照品標準曲線方程的斜率；