[發(fā)明專利]檢測(cè)鼻咽癌糖酵解相關(guān)基因分型的引物組及試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611240834.5
• 申請(qǐng)日: 2016-12-29
• 公開（公告）號(hào): CN107058486B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王暉;趙宇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王暉
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種檢測(cè)鼻咽癌糖酵解相關(guān)基因分型的引物組，其特征在于，所述糖酵解相關(guān)基因分別為GCK基因、HK2基因及HIF1-α基因，所述GCK基因、HK2基因及HIF1-α基因的多態(tài)性位點(diǎn)分別為GCK rs2244164、HK2 rs656489及HIF1-αrs10136168，所述引物組包括：

(1)對(duì)于GCK rs2244164位點(diǎn)，

擴(kuò)增引物為：

GCK rs2244164正向擴(kuò)增引物：

5’-ACGTTGGATGCATAATGTGTTTTCTCCGCC-3’；

GCK rs2244164反向擴(kuò)增引物：

5’-ACGTTGGATGGGGACTTACTCCTGATCTAC-3’；

(2)對(duì)于HK2 rs656489位點(diǎn)，

擴(kuò)增引物為：

HK2 rs656489正向擴(kuò)增引物：

5’-ACGTTGGATGCTGGTGTCTAGCATTAGCTG-3’；

HK2 rs656489反向擴(kuò)增引物：

5’-ACGTTGGATGTGATCTTGGACATGGGATGG-3’；

(3)對(duì)于HIF1-αrs10136168位點(diǎn)，

擴(kuò)增引物為：

HIF1-αrs10136168正向擴(kuò)增引物：

5’-ACGTTGGATGTCACCCTCTGATGCAGTTAC-3’；

HIF1-αrs10136168反向擴(kuò)增引物：

5’-ACGTTGGATGCAGCTCTGTTCTTTACTGCC-3’。

2.一種檢測(cè)鼻咽癌糖酵解相關(guān)基因分型的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權(quán)利要求1所述的引物組，分別為GCK rs2244164正向擴(kuò)增引物與反向擴(kuò)增引物、HK2rs656489正向擴(kuò)增引物與反向擴(kuò)增引物、HIF1-αrs10136168正向擴(kuò)增引物與反向擴(kuò)增引物，還包括PCR Buffer，MgCl₂，dNTP及Taq酶的PCR預(yù)混液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR預(yù)混液中各試劑組分配比為：1×PCR Buffer；MgCl₂ 25mM；dNTP 25mM；Taq酶5U/μl；引物組500nM；及適量超純水。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括：陽(yáng)性對(duì)照品和陰性對(duì)照品，所述陽(yáng)性對(duì)照品為突變型標(biāo)準(zhǔn)品DNA，所述陰性對(duì)照品為野生型標(biāo)準(zhǔn)品DNA。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述超純水為HPLC級(jí)別的水。

6.權(quán)利要求1所述的引物組在制備用于檢測(cè)GCK基因、HK2基因及HIF1-α基因分型的試劑中的應(yīng)用。