[發明專利]一種具有保肝護肝功能的促肝細胞生長素制備方法在審
| 申請號： | 201611240558.2 | 申請日： | 2016-12-29 |
| 公開（公告）號： | CN106632652A | 公開（公告）日： | 2017-05-10 |
| 發明（設計）人： | 張奇;趙兵;趙亮亮 | 申請（專利權）人： | 中馭（北京）生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/475 | 分類號： | C07K14/475;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;C07K1/14 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100101 北京市朝*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 具有 保肝護 肝功能 肝細胞 生長素 制備 方法 | ||
1.一種具有保肝護肝功能的低分子量豬胎肝促肝細胞生長素制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)將健康乳豬肝筋膜去除，剪碎至1-1.5cm3；以豬胎肝∶生理鹽水＝2∶3比例加入0.85％生理鹽水，充分破碎、勻漿；
(2)將(1)于95℃熱變性/10～90min；高速離心后，收集上清液，測蛋白濃度，加入總蛋白1/40～1/100的胰蛋白酶，pH7.0-pH8.2，37℃水解0.5～2h，離心收集上清液；
(3)以10kD超濾膜過濾，收集超濾液，75％終濃度丙酮沉淀，去離子水復溶后Sephadex G-50凝膠柱分離純化，收集蛋白峰；
(4)真空冷凍干燥(3)，獲得低分子量豬胎肝促肝細胞生長素。
2.根據權利要求1所述的低分子量豬胎肝促肝細胞生長素制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的胰蛋白酶最佳使用比例為1/50，最佳水解時間為1h。
3.根據權利要求1所述的低分子量豬胎肝促肝細胞生長素制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述洗脫液應為去離子水。
4.據權利要求1所述的低分子量豬胎肝促肝細胞生長素，其特征在于，活性最佳的豬胎肝促肝細胞生長素分子量為8kDa。
5.根據權利要求4所述的促肝細胞生長素，其特征在于，其在不同濃度下可雙向調節肝細胞生長，在1.5μg/mL～15μg/mL時可有效促進肝細胞的增殖，在濃度大于150μg/mL時，可抑制肝細胞的生長。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中馭（北京）生物工程有限公司，未經中馭（北京）生物工程有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201611240558.2/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
