[發明專利]一種多價肺炎球菌莢膜多糖結合疫苗的制備方法

有效

• 申請號: 201611239432.3
• 申請日: 2016-12-28
• 公開（公告）號: CN106822884B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 王婷婷;游哲榮;題靖;張明華;何迎楓;劉建凱
• 申請（專利權）人: 北京民海生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/09
• 分類號: A61K39/09;A61K39/116;A61P31/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

本發明涉及疫苗制備，具體公開了一種多價肺炎球菌莢膜多糖結合疫苗的制備方法：基于配制的終體積，先加入氯化鈉和聚山梨酯80，之后再加入鋁佐劑，根據不同血清型肺炎球菌莢膜多糖?蛋白結合物原液與鋁佐劑的吸附率，將吸附率較低的血清型優先進行吸附，再對其它血清型結合物進行吸附，最后加入琥珀酸提高溶液緩沖能力。采用本發明提供的方法制備得到的多價肺炎球菌莢膜多糖結合疫苗，吸附率高，穩定性好，可在控制多糖及蛋白載體含量的條件下，最大限度的發揮多價肺炎球菌結合疫苗的免疫效果。

技術領域

本發明涉及疫苗制備，具體地說，涉及一種多價肺炎球菌莢膜多糖結合疫苗的制備方法。

背景技術

抗原與佐劑的吸附率是決定疫苗免疫效果的關鍵因素，在吸附過程中，抗原與佐劑通過靜電力等物理作用力相互結合，通過增加抗原的表面積，可增強抗原的免疫效果。同時，佐劑吸附的疫苗可在接種點產生“儲存庫效應”，使抗原在局部組織內貯存，通過抗原的緩慢釋放，充分延長抗原作用時間，提高免疫應答。一般認為，佐劑的吸附率越高，免疫效果相應也越好，反之吸附率越低，免疫效果則越差。WHO要求白喉和破傷風類毒素疫苗的吸附率不低于80％，但肺炎球菌結合疫苗的吸附率普遍偏低。因此，在現有技術的基礎上，進一步提高肺炎球菌結合疫苗的吸附率，對于提高肺炎球菌結合疫苗的免疫效果是很有必要的。

鋁佐劑是目前使用最廣泛的佐劑之一，也是國內目前批準的唯一可用于人體的佐劑，廣泛用于疫苗產品，國內目前的乙型肝炎疫苗，無細胞百白破疫苗等都是含鋁佐劑的吸附疫苗。

目前，關于肺炎球菌結合疫苗吸附工藝的報道尚少，現有已公開的肺炎球菌結合疫苗鋁佐劑吸附工藝是將13種肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物混合后直接加入鋁佐劑進行吸附，該方法易造成少數血清型吸附率較低，影響免疫效果。

發明內容

為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的是提供一種制備多價肺炎球菌莢膜多糖結合疫苗的新方法。

為了實現本發明目的，本發明的技術方案如下：

第一方面，本發明提供了一種多價疫苗的制備方法，根據抗原的吸附率，由低到高將其與佐劑進行有先后順序的分步吸附。

具體而言，本發明提供了一種多價肺炎球菌莢膜多糖結合疫苗的制備方法，相應的，在肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物與佐劑進行吸附的過程中：先將吸附率較低的血清型肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物與鋁佐劑進行吸附，再將其他血清型肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物與鋁佐劑進行吸附。

需要說明的是，所述“吸附率較低”為一種相對概念，即根據所要制備的多價疫苗中各單價血清型肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物原液與鋁佐劑的吸附率，選擇吸附率相對較低的單價血清型肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物原液優先與鋁佐劑進行吸附。

所述制備方法主要包括以下步驟：基于配制的終體積，先加入氯化鈉和聚山梨酯80，之后再加入鋁佐劑，根據不同血清型肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物原液與鋁佐劑的吸附率，將吸附率較低的血清型優先進行吸附，再對其它血清型結合物進行吸附，最后加入琥珀酸提高溶液緩沖能力。

更為具體地，所述制備方法包括如下順序的步驟：

S1、向配置容器中加入所需體積的0.15mol/L氯化鈉溶液；

S2、向氯化鈉溶液中加入0.5～2％聚山梨酯80得到溶液1，使聚山梨酯80的終濃度為0.005-0.02％；

S3、向溶液1中加入濃度為1～2mg/mL的鋁佐劑溶液得到溶液2，充分攪拌5-10分鐘，使鋁佐劑的終濃度為0.1～0.25mg/mL；

S4、向溶液2中先加入吸附率較低的血清型肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物，吸附30～120分鐘后，再加入其他血清型肺炎球菌莢膜多糖-蛋白結合物，繼續吸附16～24小時，得到溶液3；