[發(fā)明專利]一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611224970.5 | 申請日： | 2016-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN107058453B | 公開（公告）日： | 2020-02-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張利坤;肖延銘;錢敏帆;楊衛(wèi)華;談聰 | 申請（專利權(quán)）人： | 長興制藥股份有限公司 |
| 主分類號： | C12P41/00 | 分類號： | C12P41/00;C12P13/02;C12N1/20;C12N9/20;C12N11/14;C12N11/082;C12R1/01 |
| 代理公司： | 杭州豐禾專利事務(wù)所有限公司 33214 | 代理人： | 高濱 |
| 地址： | 313100 浙江省湖州市*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物 催化 拆分 賴諾普利 氫化物 方法 | ||
1.一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法，其特征在于：該方法以賴諾普利氫化物為底物原料，加入合適體積的水，在脂肪酶存在的條件下發(fā)生選擇性酯水解(R,S)-賴諾普利氫化物，保留(S,S)-賴諾普利氫化物；反應(yīng)完全后，將混合液分離，獲得(S,S)-賴諾普利氫化物；所述脂肪酶采用通過不動桿菌(Acinetobacter sp.)Cxzy-L119產(chǎn)生的胞內(nèi)脂肪酶，該菌種保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址：中國.武漢.武漢大學(xué)，郵編：430072，保藏日期：2016年10月17日，保藏編號：CCTCC NO：M 2016572。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法，其特征在于：所述反應(yīng)時間為4～36h、反應(yīng)溫度為35～38℃，反應(yīng)pH維持在7.0～7.3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法，其特征在于：所述賴諾普利氫化物在反應(yīng)體系濃度10～80g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法，其特征在于：按體積比向反應(yīng)液中加入1:0.1～0.2的助溶劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法，其特征在于：所述脂肪酶以固定化細(xì)胞重量計，所述固定化細(xì)胞量為5～40g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法，其特征在于：反應(yīng)結(jié)束后，將上述反應(yīng)液真空抽濾，保留固定化細(xì)胞以便重復(fù)使用，再將抽濾后得到的反應(yīng)液35～60℃旋蒸除去助溶劑和水解副產(chǎn)物乙醇，調(diào)節(jié)pH為7.2～7.8，按體積比向反應(yīng)液中加入1:0.7～1.5的乙酸乙酯，30～50℃保溫并攪拌2～4h，萃取1～3次，分層后保留有機(jī)相，將有機(jī)相合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙酸乙酯，得固體濃縮物，(S,S)-賴諾普利氫化物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物催化拆分賴諾普利氫化物的方法，其特征在于：采用硅藻土吸附結(jié)合聚乙烯亞胺和戊二醛交聯(lián)法固定化不動桿菌(Acinetobacter sp.)Cxzy-L119細(xì)胞。
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